硼替佐米對內皮細胞的細胞毒性效應和細胞遷移的影響.pdf

1、本文分兩部分，第一部分：硼替佐米對微血管內皮細胞株HMEC-1的細胞毒性效應和細胞遷移的影響。
　　 目的：觀察0、2.5、5.0、10nmol/L硼替佐米對內皮細胞株HMEC-1的細胞毒性效應和細胞遷移的影響。
　　 方法：細胞計數試劑盒CCK-8檢測細胞的相對增殖活力；AnnexinV/PI雙標法檢測細胞的凋亡率：采用Transwell模型觀察細胞遷移率的改變；
　　 結果：2.5、5.0nmol/L濃度硼替

2、佐米作用12h，對HMEC-1細胞增殖無明顯抑制作用，10nmol/L時細胞增殖活力為0.874±0.062（P=0.024，對照組細胞增殖活力設為1.0）；24h、48h時，硼替佐米表現了更強的細胞增殖抑制效應，10nmol/L時細胞增殖活力分別為0.635±0.030、0.164±0.009（P<0.0001）。2.5、5.0、10nmol/L濃度硼替佐米分別作用細胞12h時，細胞凋亡率分別為2.0％、1.6％、2.7％，與對照組（

3、3.5％）無明顯差異，而10nmol/L濃度硼替佐米作用細胞24h時，細胞凋亡率為18.1％。2.5、5.0、10nmol/L硼替佐米作用12h均明顯降低了細胞的遷移率（P<0.05）。
　　 結論：較高濃度、較長時間的硼替佐米對微血管內皮細胞株HMEC-1表現出一定的細胞毒性效應；同時硼替佐米可有效抑制HMEC-1的遷移，并且其對遷移的抑制作用早于細胞毒性效應的出現。
　　 第二部分：硼替佐米抑制微血管內皮細胞株HME

4、C-1遷移的機制探討。
　　 目的：觀察0、2.5、5.0、10nmol/L硼替佐米作用內皮細胞株HMEC-112h后，血管新生相關分子VEGF及Annexin A2表達的變化，以探討硼替佐米抑制細胞遷移的可能機制：并觀察HIF-1α的轉錄調節(jié)活性的變化，分析VEGF表達變化可能的機制。
　　 方法：實時定量PCR檢測Annexin A2、VEGF的基因表達水平，Western印跡法觀察Annexin A2在蛋白水平的變

5、化；逆轉錄PCR（RT-PCR）檢測HIF-1α轉錄調節(jié)活性指標CAIX基因表達的水平。
　　 結果：2.5、5.0、10nmol/L硼替佐米作用內皮細胞株HMEC-112h后，均明顯抑制了Annexin A2和VEGF基因的表達（P<0.05），Western印跡同樣顯示Annexin A2在蛋白水平的表達下調，RT-PCR結果表明硼替佐米同樣抑制了HIF-1α的轉錄調節(jié)活性的標志基因--CAIX基因的表達。
　　 結