文冠果殼苷對(duì)β淀粉樣蛋白致癡呆小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的改善作用及線粒體相關(guān)機(jī)制研究.pdf

1、目的:文冠果殼苷是一種從文冠果果殼中提取獲得的單體化合物，前期研究證實(shí)其對(duì)多種癡呆模型動(dòng)物的學(xué)習(xí)記憶障礙具有改善作用。為進(jìn)一步探討文冠果殼苷對(duì)阿爾茨海默病(AD)的防治作用及作用機(jī)制，本文考察了文冠果殼苷對(duì)一次性側(cè)腦室注射Aβ1-42致癡呆模型小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的改善作用及線粒體相關(guān)機(jī)制。
　　方法:一次性側(cè)腦室注射Aβ1-42制備癡呆小鼠模型，通過(guò)水迷宮、Y迷宮、新物體辨別及避暗實(shí)驗(yàn)考察文冠果殼苷對(duì)模型小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的影響;通過(guò)

2、透射電鏡觀察小鼠大腦皮層及海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞線粒體的超微結(jié)構(gòu)，并利用生物化學(xué)發(fā)光法考察大腦皮層及海馬ATP的水平;利用Percoll密度梯度離心的方法分離小鼠大腦皮層線粒體，透射電鏡觀察獲得線粒體的超微結(jié)構(gòu)，并通過(guò)測(cè)定乳酸脫氫酶(LDH)的含量及線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅳ(即細(xì)胞色素c氧化酶，COX)的活性驗(yàn)證分離線粒體的純度及活性。利用分離獲得的線粒體測(cè)定COX、丙酮酸脫氫酶復(fù)合體(PDHC)及α-酮戊二酸脫氫酶復(fù)合體(KGDHC)的活性

3、。利用熒光分光光度法考察小鼠大腦皮層及海馬活性氧(ROS)的水平。通過(guò)免疫組織化學(xué)方法考察小鼠大腦皮層及海馬內(nèi)DNA氧化損傷生物標(biāo)志物8-羥基鳥苷(8-OH-dG)的表達(dá)，并考察線粒體細(xì)胞色素c的釋放情況。 結(jié)果:文冠果殼苷對(duì)一次性側(cè)腦室注射Aβ1-42致癡呆模型小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙具有顯著的改善作用。與模型組比較，文冠果殼苷（0.16～0.32mg/kg）顯著縮短水迷宮實(shí)驗(yàn)中小鼠到達(dá)安全臺(tái)的逃避潛伏期及游泳路程，并顯著增加小鼠在

4、原安全臺(tái)所在象限游泳時(shí)間和游泳路程百分比;顯著提高Y迷宮實(shí)驗(yàn)中小鼠自發(fā)交替反應(yīng)率;顯著提高新物體辨別實(shí)驗(yàn)中小鼠對(duì)新物體的優(yōu)先指數(shù)和辨別系數(shù);顯著提高避暗實(shí)驗(yàn)中小鼠進(jìn)入暗室的潛伏期。文冠果殼苷可改善神經(jīng)細(xì)胞線粒體的超微結(jié)構(gòu)并顯著增加模型小鼠大腦皮層及海馬ATP的水平，改善線粒體的功能。文冠果殼苷顯著對(duì)抗模型小鼠線粒體COX、PDHC及KGDHC活性的下降;顯著逆轉(zhuǎn)模型小鼠大腦皮層及海馬ROS水平的異常升高。免疫組化結(jié)果顯示，文冠果殼苷能夠

5、顯著降低模型小鼠大腦皮層及海馬8-OH-dG的表達(dá);顯著減少模型小鼠線粒體細(xì)胞色素c的釋放。
　　結(jié)論:文冠果殼苷對(duì)一次性側(cè)腦室注射Aβ1-42致癡呆模型小鼠的學(xué)習(xí)記憶障礙具有顯著的改善作用，并且能夠改善線粒體功能，減少ROS的產(chǎn)生及對(duì)抗氧化應(yīng)激;其對(duì)線粒體功能的改善作用可能與對(duì)抗Aβ引起的線粒體呼吸鏈及三羧酸循環(huán)的損傷，減少線粒體細(xì)胞色素c的釋放，從而對(duì)抗Aβ誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞死亡有關(guān)。因此，本研究及前期試驗(yàn)結(jié)果提示，文冠果殼苷具有