PI3K抑制劑聯(lián)合Ad-PTEN抑制人腦膠質瘤細胞生長的體內外研究.pdf_第1頁
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1、天津醫(yī)科大學碩士學位論文PI3K抑制劑聯(lián)合AdPTEN抑制人腦膠質瘤細胞生長的體內外研究姓名:宋云朋申請學位級別:碩士專業(yè):外科學神外指導教師:鐘躍20100501天津醫(yī)科大學碩士學位論文本課題研究分為以下二個部分:第一部分中應用四唑鹽(MTT)比色法測定LY294002單獨及其聯(lián)合ADPTEN在體外人腦膠質瘤細胞系U251、LN229中的半數(shù)抑制濃度(IC50),然后通過MTT法分析腫瘤細胞增殖活性,流式細胞儀分析細胞周期,Annex

2、inVFITC檢測細胞凋亡,細胞劃痕、Transwell法檢測膠質瘤細胞遷移和侵襲能力,Westernblot檢測相關蛋白的表達。結果顯示,LY294002單獨及其聯(lián)合PTEN在人腦膠質瘤體外細胞系U251、LN229中IC50近似為127、169umol/L630、81lumol/L。聯(lián)合治療組自培養(yǎng)第2天起,細胞增殖速率呈下降趨勢,且低于對照組和LY294002治療組(均P005)。聯(lián)合(LY294002AD—PTEN)治療組細胞周

3、期阻滯在GO/Gl期,S期減少(均P005);凋亡率增an(均P005)i聯(lián)合治療組遷移和侵襲的細胞相對數(shù)少于對照組和LY294002治療組(均P005)。與對照組和LY294002治療組比較,聯(lián)合治療組的PTEN蛋白明顯上調,而PCNA、P觸、CyclinDl、bcl2、MMP9、PR蛾蛋白顯著下降(均P005)。第二部分建立LN229裸鼠皮下荷瘤模型,將模型分為DMS0組、空載組、LY294002組、聯(lián)合組。每組6只。并在腫瘤局部多

4、點注射治療,每4天測量一次腫瘤體積,動態(tài)測量腫瘤生長。免疫組化法檢測腫瘤標本的相關蛋白表達情況分析可能的抑癌機制。結果表明,聯(lián)合治療組對裸鼠移植瘤人腦膠質瘤的抑制作用較對照組及LY294002治療組均明顯增強(均P001);與對照組及LY294002治療組比較聯(lián)合治療組Caspase3、PTEN表達顯著升高(均P005),P)dot、CyclinDl、MMP9、P。FAK的表達均顯著下降(均PO05)。結論:體內外研究中與LY29400

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