PI3K抑制劑聯(lián)合Ad-PTEN抑制人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的體內(nèi)外研究.pdf

1、天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文PI3K抑制劑聯(lián)合AdPTEN抑制人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的體內(nèi)外研究姓名：宋云朋申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：外科學(xué)神外指導(dǎo)教師：鐘躍20100501天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文本課題研究分為以下二個(gè)部分：第一部分中應(yīng)用四唑鹽(MTT)比色法測(cè)定LY294002單獨(dú)及其聯(lián)合ADPTEN在體外人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U251、LN229中的半數(shù)抑制濃度(IC50)，然后通過MTT法分析腫瘤細(xì)胞增殖活性，流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞周期，Annex

2、inVFITC檢測(cè)細(xì)胞凋亡，細(xì)胞劃痕、Transwell法檢測(cè)膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移和侵襲能力，Westernblot檢測(cè)相關(guān)蛋白的表達(dá)。結(jié)果顯示，LY294002單獨(dú)及其聯(lián)合PTEN在人腦膠質(zhì)瘤體外細(xì)胞系U251、LN229中IC50近似為127、169umol／L630、81lumol／L。聯(lián)合治療組自培養(yǎng)第2天起，細(xì)胞增殖速率呈下降趨勢(shì)，且低于對(duì)照組和LY294002治療組(均P005)。聯(lián)合(LY294002AD—PTEN)治療組細(xì)胞周

3、期阻滯在GO／Gl期，S期減少(均P005)；凋亡率增an(均P005)i聯(lián)合治療組遷移和侵襲的細(xì)胞相對(duì)數(shù)少于對(duì)照組和LY294002治療組(均P005)。與對(duì)照組和LY294002治療組比較，聯(lián)合治療組的PTEN蛋白明顯上調(diào)，而PCNA、P觸、CyclinDl、bcl2、MMP9、PR蛾蛋白顯著下降(均P005)。第二部分建立LN229裸鼠皮下荷瘤模型，將模型分為DMS0組、空載組、LY294002組、聯(lián)合組。每組6只。并在腫瘤局部多

4、點(diǎn)注射治療，每4天測(cè)量一次腫瘤體積，動(dòng)態(tài)測(cè)量腫瘤生長(zhǎng)。免疫組化法檢測(cè)腫瘤標(biāo)本的相關(guān)蛋白表達(dá)情況分析可能的抑癌機(jī)制。結(jié)果表明，聯(lián)合治療組對(duì)裸鼠移植瘤人腦膠質(zhì)瘤的抑制作用較對(duì)照組及LY294002治療組均明顯增強(qiáng)(均P001)；與對(duì)照組及LY294002治療組比較聯(lián)合治療組Caspase3、PTEN表達(dá)顯著升高(均P005)，P)dot、CyclinDl、MMP9、P。FAK的表達(dá)均顯著下降(均PO05)。結(jié)論：體內(nèi)外研究中與LY29400