miR-370抑制人腦膠質(zhì)瘤細胞增殖與遷移的研究.pdf

1、microRNA是一類具有調(diào)控作用的非編碼的RNA分子，近年來的研究表明miRNA可以在轉(zhuǎn)錄后水平對基因的表達進行調(diào)控，異常表達的miRNA與腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。盡管有些異常表達的miRNAs作用機制已被闡釋，但關(guān)于miR-370在腦膠質(zhì)瘤的研究尚無報道。
　　為了探討miR-370在腦膠質(zhì)瘤中的作用，首先應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)對miR-370在腦膠質(zhì)瘤組織樣品和腦膠質(zhì)瘤細胞系中的表達情況進行分析，結(jié)果表明大部分腦膠質(zhì)

2、瘤組織中miR-370的表達量均低于正常組織，并且miR-370在SHG44、U87及U251三種腦膠質(zhì)瘤細胞中的表達量相對于正常腦組織亦存在不同程度的下降。采用MTT增殖實驗發(fā)現(xiàn)miR-370過表達能夠抑制腦膠質(zhì)瘤細胞的增殖，而抑制miR-370的表達則對腦膠質(zhì)瘤細胞的增殖具有促進作用。為了進一步探究miR-370的作用機制，采用PI/Annexin V雙染實驗利用流式細胞儀分析細胞凋亡情況，發(fā)現(xiàn)miR-370過表達時可以促進腦膠質(zhì)瘤

3、細胞的凋亡。此外，通過PI染色分析發(fā)現(xiàn)，miR-370對腦膠質(zhì)瘤細胞周期各時相沒有顯著性影響。細胞劃痕實驗實驗結(jié)果顯示，過表達miR-370時可以抑制腦膠質(zhì)瘤細胞的遷移能力，而抑制miR-370表達時能夠促進腦膠質(zhì)瘤細胞的遷移能力。通過生物信息軟件分析發(fā)現(xiàn)DNMT3A可能是miR-370的靶基因，應(yīng)用實時熒光定量PCR和Western blot實驗發(fā)現(xiàn)，miR-370可以調(diào)控DNMT3A在mRNA水平以及蛋白水平的表達，并且雙熒光素酶報