
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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:本實(shí)驗(yàn)擬研究人腦膠質(zhì)瘤組織中PARP-1 mRNA的表達(dá);觀察給予替莫唑胺、PARP-1抑制劑BMN-673后膠質(zhì)瘤細(xì)胞中PARP-1的表達(dá);然后對(duì)膠質(zhì)瘤U251、U87細(xì)胞系予以PARP-1抑制劑BMN-673與替莫唑胺單獨(dú)用藥及聯(lián)合用藥,通過(guò)彗星實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞的DNA損傷;通過(guò)CCK-8試驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)觀察細(xì)胞增殖抑制、細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期阻滯水平,以初步探討PARP-1抑制劑BMN-673與替莫唑胺聯(lián)用治療膠質(zhì)瘤的可能機(jī)制,并為
2、其臨床治療提供基礎(chǔ)理論依據(jù)。
方法:收集中南大學(xué)湘雅醫(yī)院神經(jīng)外科2013年10月至2014年01月35例新鮮膠質(zhì)瘤、5例新鮮正常腦組織標(biāo)本,用定量RT-PCR測(cè)定其腫瘤正常組組織間的PARP-1 mRNA表達(dá)差異及與膠質(zhì)瘤病理分級(jí)的關(guān)系。對(duì)惡性星形膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U251、惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系U87予以替莫唑胺、PARP-1抑制劑BMN-673處理,并通過(guò)RT-PCR測(cè)定其PARP-1的表達(dá)情況。對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞予以替莫唑胺、BMN
3、-673單獨(dú)及聯(lián)合用藥,通過(guò)彗星實(shí)驗(yàn)檢測(cè)DNA損傷,CCK-8試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)抑制、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期阻滯情況。
結(jié)果:膠質(zhì)瘤組織中PARP-1 mRNA的表達(dá)水平比正常腦組織顯著升高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);腫瘤不同級(jí)別間PARP-1 mRNA表達(dá)量存在差異,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.01)。對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞予以替莫唑胺、BMN-673及聯(lián)合用藥后,PARP-1 mRNA表達(dá)水平較正常培養(yǎng)組存在差異,具有統(tǒng)計(jì)
4、學(xué)意義(P<0.05)。替莫唑胺與BMN-673聯(lián)合用藥后,U251、U87細(xì)胞的DNA損傷加重,增殖受到明顯抑制,細(xì)胞凋亡增加,細(xì)胞周期G2/M期受到阻滯。
結(jié)論:1.PARP-1 mRNA的表達(dá)在膠質(zhì)瘤組織中明顯增高,且與病理級(jí)別呈正相關(guān);2.予以PARP-1抑制劑BMN-673并與常用化療藥物TMZ聯(lián)用,膠質(zhì)瘤細(xì)胞中PARP-1 mRNA表達(dá)升高;3.PARP-1抑制劑BMN-673對(duì)替莫唑胺在膠質(zhì)瘤細(xì)胞治療中有增敏作用
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