基于代謝組學的民族藥燈盞細辛、沙棘有效性評價及作用機制研究.pdf

1、民族藥在治療心腦血管等復雜疑難疾病方面相對于單一化學成分藥物有其獨到之處。但是對民族藥有效性和安全性的現代認識和評價成為制約其發(fā)展的關鍵問題,尤其應在民族藥的有效性評價和作用機制研究的思路和方法等方面進行總結和提煉,建立一套體現民族醫(yī)藥特點、系統(tǒng)論和還原論相結合的研究新方法。
　　苗藥燈盞細辛和藏藥沙棘分別是臨床上用于防治缺血性中風和胸痹心痛的療效確切的常用藥,二者的應用歷史悠久,在民族藥中占有十分重要的地位,如很多藏藥制劑中均含

2、有沙棘膏,且均被藥典收載,具有較高的市場占有率,此外二者的藥效物質基礎都是業(yè)已證明對心腦血管疾病具有明顯治療作用的黃酮類成分,故以苗藥燈盞細辛和藏藥沙棘為例,具有較好的代表性和推廣價值。
　　目的：
　　在民族醫(yī)藥學理論體系的指導下,結合系統(tǒng)化學生物學的思路和代謝組學的方法,以治療缺血性中風的苗藥燈盞細辛和防治胸痹心痛證的藏藥沙棘為例,嘗試建立基于代謝組學的民族藥防治心腦血管疾病的有效性評價和作用機制研究的新方法。
　

3、　方法：
　　應用線栓法阻塞大腦中動脈致大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型和腎上腺素加冰水致急性血瘀證大鼠模型,分別進行苗藥燈盞細辛和藏藥沙棘的藥效學研究;同時基于超高效液相色譜結合四極桿飛行時間串聯質譜(UPLC-Q TOF/MS)和主成份分析、偏最小二乘法-判別分析等模式識別技術對造模和給藥前后大鼠的尿液進行代謝譜型分析,開展基于代謝組學的民族藥有效性評價和作用機制研究。
　　結果：
　　(1)藥效學研究:燈盞細辛注射

4、液能明顯地減少腦梗死面積,改善大鼠腦組織形態(tài)學病變,并能促進尼氏小體數量的增加,這可能是通過減少海馬區(qū)神經細胞凋亡促進因子——Bax蛋白表達,對抗缺血再灌注后誘導的細胞凋亡,從而發(fā)揮腦保護作用的;亦能明顯促進神經功能缺失體征的提前恢復;綜合各指標的結果提示,量-效關系不規(guī)則,療效由強到弱依次為:低劑量>高劑量>中劑量。
　　沙棘提取物能夠明顯降低急性血瘀證大鼠的血液粘稠度和紅細胞濃度,減弱紅細胞聚集能力和血液凝固能力,最終改善急性

5、血瘀大鼠血液流變學的“濃、粘、凝、聚”等異常特征;其中又以沙棘提取物高劑量和低劑量的作用最明顯。
　　(2)基于代謝組學的有效性評價:燈盞細辛注射液和沙棘提取物能使模型動物的代謝譜型向正常動物回歸,其中低劑量優(yōu)于高劑量,后者又優(yōu)于中劑量。
　　(3)基于代謝組學的作用機制研究:燈盞細辛注射液減弱或取消了外界刺激因素“線栓法阻塞大腦中動脈”對機體的作用,使模型大鼠的代謝譜型向正常動物回歸,其作用機制可能與犬尿喹啉酸、琥珀酰鳥氨

6、酸和亮氨酰脯氨酸等潛在生物標志物有關,它們又有可能涉及“色氨酸-犬尿喹啉酸”和“琥珀酰鳥氨酸-尿素循環(huán)-NO”等代謝途徑。
　　沙棘提取物減弱或取消了外界刺激因素“腎上腺素結合冰水”對機體的作用,使模型大鼠的代謝譜型向正常動物回歸,其作用機制可能與苯丙氨酸、色氨酸、琥珀酰鳥氨酸、犬尿喹啉酸、鵝去氧膽酸和膽酸等潛在生物標志物有關,它們有可能涉及“苯丙氨酸-酪氨酸-兒茶酚胺類”、“色氨酸-5-羥色胺”、“琥珀酰鳥氨酸-尿素循環(huán)-NO”

7、和“膽固醇-膽汁酸-膽紅素”等代謝途徑。
　　結論：
　　本文證實了代謝組學對苗藥燈盞細辛和藏藥沙棘有效性的評價與藥效學研究結果的一致性;代謝組學還揭示了民族藥所調控的機體潛在生物標志物及其代謝途徑,豐富了民族藥的作用機制研究;此外本文闡釋了急性血瘀“證”本質的生化物質基礎。故代謝組學可以作為民族藥的有效性評價和作用機制研究的新方法,亦拓寬了民族藥現代研究的思路。
　　創(chuàng)新點：
　　(1)本文揭示了腦缺血再灌注損