Cdc42在心肌細(xì)胞缺血再灌注中的作用.pdf

1、目的:隨著溶栓療法、經(jīng)皮穿刺冠狀動脈腔內(nèi)成形術(shù)、冠狀動脈旁路移植術(shù)等治療方法廣泛應(yīng)用于臨床,急性心肌梗死的治療進(jìn)入了再灌注時(shí)代。而心肌在較長時(shí)間缺血造成一定損傷后,恢復(fù)供血不但不減輕或逆轉(zhuǎn)損傷,反而加重心肌細(xì)胞損傷,這一異?，F(xiàn)象稱為缺血再灌注損傷。在臨床上,心肌缺血再灌注損傷主要表現(xiàn)為心肌頓抑、再灌注心律失常、心肌細(xì)胞壞死、內(nèi)皮和微血管功能失調(diào)包括無復(fù)流現(xiàn)象等。因此,如何減輕缺血再灌注損傷,最大限度保護(hù)缺血心肌,成為心血管研究的重點(diǎn)之一

2、。本文研究細(xì)胞周期蛋白(Cell division cycle42,Cdc42)對缺血/再灌注(I/R)中乳鼠心肌細(xì)胞凋亡率的影響及其可能的作用機(jī)制,為臨床上缺血再灌注損傷的預(yù)防提供一定的理論基礎(chǔ)。
　　 方法:分離培養(yǎng)SD大鼠心肌細(xì)胞,建立I/R模型。實(shí)驗(yàn)分組:①正常對照組(control組):正常培養(yǎng)心肌細(xì)胞,不進(jìn)行缺氧復(fù)氧:②缺血再灌注組(I/R組):缺氧4h,復(fù)氧4h或24h;③脂質(zhì)體組(Oli組):只用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染心肌細(xì)

3、胞(不加入寡核苷酸),然后缺氧4h,復(fù)氧4h或24h;④脂質(zhì)體+反義寡核苷酸組(As組):加入脂質(zhì)體與Cdc42反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染心肌細(xì)胞,然后缺氧4h,復(fù)氧4h或24h;⑤脂質(zhì)體+錯義寡核苷酸組(Ms組):加入脂質(zhì)體與Cdc42錯義寡核苷酸轉(zhuǎn)染心肌細(xì)胞,然后缺氧4h,復(fù)氧4h或24h;⑥SP600125+As組:加入脂質(zhì)體與Cdc42反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染心肌細(xì)胞,在缺氧前30min加入JNK阻斷劑(SP600125),然后缺氧4h,復(fù)氧4h

4、或24h;⑦SP600125組:在缺氧前30min加入丁NK阻斷劑(SP600125),然后缺氧4h,復(fù)氧4h或24h。用流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞凋亡率,westernblot測定Cdc42、JNK、p-JNK、Bax、Bcl-2的蛋白含量。
　　 結(jié)果: As組的心肌細(xì)胞凋亡率低于I/R組、Oli組和Ms組,相應(yīng)的JNK磷酸化程度是最低的且Bcl-2/Bax的比值是最高的;I/R組、Oli組和Ms組之間心肌細(xì)胞凋亡率沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;