槲皮素對兔缺血再灌注心肌NOX、NOS基因和蛋白表達的影響.pdf

1、本研究分為二部分：
　　 第一部分：兩種兔可控性急性心肌缺血再灌注模型的比較
　　 目的：完善兔可控性急性心肌缺血再灌注(I/R)動物模型的制備,提高模型成功率和動物成活率。
　　 方法：成年健康家兔60只，隨機分為假手術(shù)組30只(Sham組)、I/R1組15只和I/R2組15只。Sham組僅穿線不接扎，I/R1組選擇左冠狀動脈前降支，I/R2組選擇冠狀動脈左緣支。開胸后以5-0 prolene線穿過冠狀動脈，硅

2、膠管圈套5-0 prolene線，用血管鉗收緊硅膠管阻斷冠狀動脈血流，制備兔可控性心肌缺血再灌注模型。四肢安裝肢體導(dǎo)聯(lián)，通過心電圖ST段的改變作為心肌缺血的評定指標。
　　 結(jié)果：Sham組30只動物手術(shù)前后心電圖均無變化；I/R1組結(jié)扎后，13只動物ST段無明顯變化；2只動物ST段輕度壓低，再灌注時無心律失常表現(xiàn)；I/R2組15只動物結(jié)扎后ST段均抬高明顯，并漸與QRS波融合，QRS波幅隨著時間的延長逐漸變小，再灌注時11只出

3、現(xiàn)室性早搏，4只出現(xiàn)室性心動過速。
　　 結(jié)論：兔可控性心肌缺血再灌注模型應(yīng)選擇冠狀動脈左緣支。用血管鉗收緊硅膠管圈套5-0 prolene線的方法可以準確地復(fù)制兔心肌缺血再灌注的實驗?zāi)Ｐ?簡化實驗操作步驟。
　　 第二部分：槲皮素對兔缺血再灌注心肌NOX、NOS基因和蛋白表達的影響
　　 背景：過去大量的實驗表明，活性氧簇(ROS)、內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)參與心肌缺血再灌

4、注損傷(MIRI)的病理生理過程。NOX家族NADPH 氧化酶是一類能產(chǎn)生過氧化物、ROS的蛋白質(zhì)。研究表明，槲皮素對MIRI有很好的保護作用。
　　 目的：本實驗旨在觀察槲皮素對兔缺血再灌注心肌NOX、NOS基因和蛋白表達的影響。
　　 方法和結(jié)果：建立成年家兔心肌缺血再灌注模型，結(jié)扎左緣支30分鐘，再灌注12小時。實驗分4組：空白對照組(control)、缺血再灌注組(I/R)、槲皮素組(Que)、槲皮素+缺血再灌注

5、組(I/R+Que)。用Real Time-PCR和Western blot方法檢測心肌NOX2、eNOS、iNOS基因和蛋白的表達。I/R組NOX2、iNOS基因和蛋白表達水平明顯增高(P<0.01),eNOS變化不明顯(P<0.01)。給予槲皮素后，Que和I/R+Que組NOX2、eNOS、iNOS基因和蛋白表達水平明顯降低(P<0.01)。
　　 結(jié)論：心肌缺血再灌注后，NOX2、iNOS表達增加；槲皮素明顯減少心肌缺血