基因芯片制作中寡核苷酸或DNA的共價固定.pdf

1、該文介紹了寡核甘酸或DNA在經過適當處理的玻璃片、PMMA或PS等高分子薄片上共價固定的研究結果.1 對北普通玻璃和石英玻璃載體,發(fā)現石英玻璃在熒光檢測下背景吸收弱并且單一,適合于用熒光掃描法檢測;石英玻璃片與氨基硅烷化試劑反應在其表面連上氨丁基四乙氧基硅烷基,繼而與異硫氰酸酯反應后能與5'端或3'端氨基修飾的寡核苷酸反應,適合于寡核苷酸或DNA的共價固定;將氨基硅烷化的石英玻璃片和進口的玻璃芯片直接和熒光修飾的1,4-苯二異硫氰酸酯(

2、PDITC)作用,經熒光掃描分析,證明自制芯片的固定效果達到甚至超過國際同類芯片的水平.2 PMMA薄片水解后以亞氨基二乙酸處理,能明顯增加表面羧基密度,表明在PMMA表面可能形成了羧基密度成倍增加的樹狀體結構,PMMA薄片表面經過以上兩步修飾后,在EDAC存在下,可有效地共價固定熒光標記的寡核苷酸.如將PMMA基片先經微加工增加其比表面積,再按上述過程進行表面修飾,可望進一步提高對寡核苷酸或DNA固定的密度.但所形成的樹狀體的結構有待