基于NF-κB信號通路的高通量篩選系統(tǒng)的構(gòu)建.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩46頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、NF-κB是一種廣泛存在于哺乳動物的真核轉(zhuǎn)錄因子，能激活至少150種基因的轉(zhuǎn)錄表達，從而調(diào)控細胞凋亡、細胞粘附、細胞增殖、天然以及適應(yīng)性免疫應(yīng)答、炎癥、胞內(nèi)脅迫應(yīng)答和組織重塑等過程。NF-κB在風濕性關(guān)節(jié)炎、動脈粥樣硬化、多發(fā)性硬化和哮喘等炎癥以及前列腺癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤和淋巴癌等多種癌癥中存在持續(xù)活化狀態(tài)。抑制NF-κB信號的活化對這些疾病的治療有明顯作用。因此NF-κB已成為炎癥、癌癥等疾病治療中的一個重要靶點。為了便于大規(guī)模篩選NF-

2、κB抑制劑，我們建立了以NF-κB為靶點的高通量篩選系統(tǒng)。首先根據(jù)現(xiàn)有證據(jù)把四個串聯(lián)重復(fù)的NF-κB結(jié)合位點序列連于小啟動子miniCMV上游，然后插入到了Promega公司的質(zhì)粒pGL4.20中，最后得到能夠?qū)F-κB激活劑進行響應(yīng)的熒光素酶報告質(zhì)粒pGL4.20-κB-miniCMV。通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的方法把該質(zhì)粒轉(zhuǎn)入人胚腎293T細胞以及人前列腺癌細胞DU145中，然后利用嘌呤霉素(Puromycin)進行篩選，得到了穩(wěn)定整合該質(zhì)

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論