腫瘤細(xì)胞中E2F1對(duì)ICAM-1的調(diào)控作用及機(jī)制的初步探索.pdf

1、ICAM-1編碼一個(gè)細(xì)胞表面糖蛋白，是一種細(xì)胞間粘附分子，它多在內(nèi)皮細(xì)胞和免疫細(xì)胞中表達(dá)。ICAM-1的配體是白細(xì)胞粘附分子CD18家族中的兩個(gè)成員：即淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原-1(LFA-1)(CD11a/CD18)和巨噬細(xì)胞抗原復(fù)合體-1(Mac-1)(CD11b/CD18)。在炎癥反應(yīng)和腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移過(guò)程中，ICAM-1介導(dǎo)的細(xì)胞黏附發(fā)揮著極其關(guān)鍵的作用。有研究發(fā)現(xiàn)，病理狀態(tài)下,釋放的一些細(xì)胞因子如IFN-γ，IL-1和TNF-α等都

2、可以增加ICAM-1的表達(dá)；也有研究發(fā)現(xiàn)，在內(nèi)皮細(xì)胞中NF-kB促進(jìn)ICAM-1的轉(zhuǎn)錄調(diào)控。但是目前關(guān)于ICAM-1基因的具體表達(dá)調(diào)控機(jī)制仍然不明確。
　　 本實(shí)驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn)在前列腺腫瘤細(xì)胞系DU145中E2F1和ICAM-1的表達(dá)具有相關(guān)性。因此本研究選擇前列腺細(xì)胞系PC3和宮頸癌細(xì)胞系Hela為實(shí)驗(yàn)材料，進(jìn)一步研究E2F1和ICAM-1的表達(dá)之間的聯(lián)系。我們利用RNA干擾技術(shù)，在這兩種細(xì)胞系中分別瞬時(shí)敲低E2F1的表達(dá)后

3、，發(fā)現(xiàn)ICAM-1的mRNA水平和蛋白表達(dá)水平均有所上升。另外，在PC3細(xì)胞中瞬時(shí)高表達(dá)E2F1可使ICAM-1的表達(dá)水平顯著下降。這表明在這兩種細(xì)胞中，E2F1可能負(fù)調(diào)控ICAM-1的表達(dá)。
　　 本課題進(jìn)一步在PC3細(xì)胞系和Hela細(xì)胞系中對(duì)ICAM-1的啟動(dòng)子進(jìn)行了分析，研究了ICAM-1啟動(dòng)子上的兩個(gè)潛在的NF-κB結(jié)合位點(diǎn)。通過(guò)雙報(bào)告基因檢測(cè)分析發(fā)現(xiàn)，E2F1可能是通過(guò)與NF-kB的相互作用，利用ICAM-1啟動(dòng)子上的