不同階段增生性瘢痕skp2，E2F1的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：通過對(duì)不同時(shí)期增生期瘢痕成纖維細(xì)胞的細(xì)胞周期相關(guān)基因skp2，E2F1及蛋白的表達(dá)變化與同時(shí)期成纖維細(xì)胞所處的細(xì)胞周期的相關(guān)性進(jìn)行探討，為基因干擾治療用于增生性瘢痕的防治提供前期研究基礎(chǔ)。
　　 方法：手術(shù)切取三個(gè)月，六個(gè)月，一年及兩年的增生性瘢痕及正常皮膚各8例。用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-PCR)法檢測(cè)各時(shí)期增生性瘢痕及正常皮膚中skp2，E2F1的mRNA表達(dá)：蛋白質(zhì)免疫印跡(Western blotting)法檢測(cè)

2、標(biāo)本中二者蛋白表達(dá)水平：用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各時(shí)期增生性瘢痕中成纖維細(xì)胞的細(xì)胞周期分布情況。
　　 結(jié)果：(1)隨著HS的發(fā)展，增生性瘢痕的成纖維細(xì)胞中skp2的mRNA及蛋白表達(dá)強(qiáng)度由強(qiáng)變?nèi)酰浔磉_(dá)趨勢(shì)基本一致。3個(gè)月組、6個(gè)月組分別與1年組、2年組及正常組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，前兩者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，后三者之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。E2F1的mRNA及蛋白表達(dá)在增生性瘢痕早期也是明

3、顯高于晚期，而且兩者的表達(dá)趨勢(shì)也基本一致。3個(gè)月組、6個(gè)月組分別與1年組、2年組、正常組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；3個(gè)月組與6個(gè)月組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；1年組、2年組、正常組之間比較差異也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(2)流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果：3個(gè)月、6個(gè)月增生性瘢痕成纖維細(xì)胞主要分布在S、G2/M期；而1年組、2年組增生性瘢痕及正常組的成纖維細(xì)胞多處于G0/G1期。G0/G1、S期比例：3個(gè)月組和6個(gè)月組

4、比較無差異(P>0.05)；3個(gè)月、6個(gè)月組分別與1年、2年及正常組有差異(P<0.05)；1年組與2年組及正常組(P<0.05)：2年組與正常組無差異(P>0.05)。G2/M期比例：3個(gè)月組高于6個(gè)月組(P<0.05)；3個(gè)月、6個(gè)月組分別高與1年、2年和正常組(P<0.05)；1年、2年和正常組無差異(P>0.05)。
　　 結(jié)論：(1)增生性瘢痕早期存在細(xì)胞周期調(diào)控因子skp2，E2F1的表達(dá)異常，可能與增生性瘢痕早期成