重組口服福氏宋內(nèi)氏痢疾雙價活疫苗安全性觀察及排菌研究.pdf

1、目的：(1)觀察重組口服福氏宋內(nèi)氏痢疾雙價活疫苗免疫后的不良反應,為痢疾疫苗的推廣應用提供依據(jù)。(2)研究受試者糞便中疫苗株的檢出情況,為疫苗免疫效果提供依據(jù)。(3)對分離到的志賀菌進行毒力檢測,評價疫苗株毒力變化情況。(4)對分離到的志賀菌進行同源性分析,探討其與疫苗株和江蘇省徐州地區(qū)野生株的同源性關系。 方法：(1)選擇江蘇省徐州市豐縣地區(qū),抽取80人口服禍氏宋內(nèi)氏痢疾雙價活疫苗,觀察免疫后的各種不良反應。(2)采集受試者糞

2、便標本或肛拭子,分離培養(yǎng),觀察、挑選可疑菌落進行生化鑒定(API20E板條)和血清試探性玻片凝集試驗,挑選與疫苗株表型一致的志賀菌。(3)PCR方法檢測毒力基因virG、ipaA、ipgB和mxiD,同時進行豚鼠角結(jié)膜試驗對分離到的菌株進行毒力檢測。(4)進行PCR擴增檢測疫苗株FSW02 I相大質(zhì)粒的特征性片斷,脈沖場凝膠電泳方法對分離的菌株進行同源性分析。 結(jié)果：(1)80名受試者中總不良反應率為70.00％,其中全身不良反

3、應發(fā)生率為3.75％,局部不良反應發(fā)生率為66.25％,各種不良反應中主要以腹痛和嘔吐為主。(2)試驗期間收集糞便標本或肛拭子共計1118份。分離培養(yǎng)、挑選可疑菌落穿刺克氏雙糖鐵培養(yǎng)基,挑選得到滿足分解葡萄糖,不分解乳糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣的菌株共計347株。穿刺細菌微量生化管(尿素和蛋白胨水),保留尿素和蛋白胨水均為陰性的菌株共計121株。用API20E板條(bioMerieuex)對其進行生化鑒定,屬于志賀菌屬的共10株。(3)10株志賀菌

4、的四個毒力基因virG、ipaA、ipgB和mxiD的PCR檢測結(jié)果顯示,其中兩株菌四種毒力基因的檢測均為陰性,其余菌株四種毒力基因的檢測則呈陽性,豚鼠角結(jié)膜試驗結(jié)果與PCR檢測結(jié)果一致。(4)對分離到的菌株進行PCR擴增未檢測出疫苗株FSW02 I相大質(zhì)粒的特征性片斷。脈沖場凝膠電泳檢測顯示,分離得到的忐賀菌和江蘇省徐州地區(qū)野生株帶型的聚類相似性為85％,屬于同一個克隆系,而與疫苗株之間的聚類相似性為70％,可以認為這些菌株與疫苗株不

5、屬于同一個克隆系。 結(jié)論：(1)本次研究中重組口服福氏宋內(nèi)氏痢疾雙價活疫苗的各種不良反應發(fā)生率均高于同類研究中關于不良反應的報道,表明該疫苗的安全性還有待于進一步提高。(2)80名受試者為期16天的采樣中共分離的10株志賀菌。毒力基因virG、ipaA、ipgB和mxiD的PCR檢測結(jié)果與豚鼠角膜結(jié)膜實驗結(jié)果一致,其中8株菌有毒力,推測疫苗株返祖或受試者自然感染。(3)FSW02 I相大質(zhì)粒的特征性片斷均未在糞便樣本中分離的志賀