四株宋內氏志賀菌的比較研究.pdf

1、志賀氏菌屬(Shigella spp.)是一類能夠通過侵襲腸上皮細胞引起患者典型性痢疾癥狀(發(fā)熱、腹痛、腹瀉)的食源性細菌。宋內氏志賀菌(S.sonnei)是痢疾流行的主要病原菌之一。由于各個地區(qū)環(huán)境不同，宋內氏志賀菌呈現(xiàn)很多差別。本課題通過四株來源于不同的志賀菌(S09071、S09072、S09076、S09077)的比較研究，對志賀菌致病臨床防疫以及流行病學的研究提供一定的指導意義。通過毒力志賀氏菌大質粒缺失突變體庫構建可以更好的

2、研究毒力大質粒與染色體基因組之間的相互作用，也同時為志賀氏菌致病機理的研究打下基礎。
　　 論文首先對四株宋內氏志賀菌(S.sonnei)S09071、S09072、S09076、S09077從形態(tài)、血清凝集反應、毒力評價、生長特征、生理生化特性、耐藥性六個方面做了詳細比較研究；其次我們做了毒力基因檢測、雙向電泳、全菌蛋白表達譜的比較，從分子的角度進一步比較研究了四株菌；最后對蛋白表達圖譜的差異蛋白做了MALDI-TOF/TOF

3、質譜鑒定。另一方面本論文還建立了志賀菌毒力大質粒大片段敲除的方法。通過這些研究，取得了以下主要結果：
　　 (1)四株宋內氏志賀菌形態(tài)呈直桿狀，無芽胞、莢膜、鞭毛及菌毛，菌體表面形態(tài)凹凸不平，大小為0.5～0.7×1～2μm。菌落在LB培養(yǎng)基上呈大圓形、扁平、光滑濕潤、無色、半透明、邊緣較整齊，大小約為2.5mm。四株菌菌體和菌落形態(tài)幾乎無差別。
　　 (2)生長曲線比較發(fā)現(xiàn)S09071生長最快，S09076、S0907

4、7其次，S09072菌株生長最慢。
　　 (3)生化特性略有差別，S09076、S09077可以利用鼠李糖、L巖糖、熊果甙、七葉靈發(fā)酵而S09071、S09072不能利用。
　　 (4)耐藥性比較發(fā)現(xiàn)S09071、S09072比S09076、S09077兩株菌有更強的耐藥性，其中S09072耐藥性最強。
　　 (5)毒力評價實驗發(fā)現(xiàn)只有S09072具有上皮細胞侵襲能力，而S09071、S09076、S09077則

5、沒有侵襲力。
　　 (6)毒力基因檢測發(fā)現(xiàn)S09071、S09076、S09077部分毒力相關基因發(fā)生丟失；只有S09072毒力相關基因完整。
　　 (7)通過比較蛋白質組學研究發(fā)現(xiàn)S09071、S09072全菌蛋白表達圖譜比較一致，而S09076、S09077全菌蛋白表達圖譜也趨于一致。S09071、S09072與S09076、S09077之間有48個明顯的蛋白差異點，質譜鑒定得到47個分值有效的蛋白點，對應了43個蛋