手掌參醇提物對(duì)染矽塵大鼠肺組織ⅠⅢ型膠原合成的影響及其抗氧化應(yīng)激機(jī)制.pdf

1、目的：本研究旨在探討手掌參醇提物(GymnadeniaconopseaAlcoholExtract，GcAE)對(duì)染矽塵大鼠肺組織ⅠⅢ型膠原合成的影響及其抗氧化應(yīng)激機(jī)制。 方法：本研究采用清潔級(jí)Wistar大鼠160只，體重200-240克。隨機(jī)將大鼠分為四組，即對(duì)照組、染矽塵組、GcAE組(GcAE，8g·kg-1·d-1)、漢防己甲素(Tetrandrine，TT)組(TT，50mg·kg-1·3d-1)，每組40只。染矽塵組

2、與各治療組采用氣管暴露法每只大鼠氣管內(nèi)注入濃度為50mg/ml的矽塵混懸液1ml，對(duì)照組注入0.9％NaCl注射液。模型建立24h后各給藥組開(kāi)始灌胃給藥，對(duì)照組及染矽塵組給等容生理鹽水。給藥后，每組分5個(gè)時(shí)間點(diǎn)(7d、14d、21d、28d、60d)分別取8只大鼠將其處死。血漿中丙二醛(maleicdialdehyde，MDA)、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(glutathione

3、peroxidase，GSH-PX)測(cè)定分別采用南京建成生物工程研究所MDA、SOD和GSH-PX試劑盒。支氣管肺泡灌洗液(bronchialalveolarfluid，BALF)中一氧化氮(nitricoxide，NO)、總一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase，NOS)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase，iNOS)測(cè)定采用南京建成生物工程研究所NO、NOS、iNOS試劑盒。H

4、E染色觀察大鼠肺組織矽結(jié)節(jié)。天狼猩紅染色法結(jié)合偏振光顯微鏡觀察ⅠⅢ型膠原。用組織芯片儀制作組織芯片微陣列，PV二步法檢測(cè)組織芯片iNOS蛋白的表達(dá)情況。用Image-ProPlusVersion4.5forwindowsTM圖象分析系統(tǒng)進(jìn)行定量分析。 結(jié)果：1染矽塵組大鼠各時(shí)間點(diǎn)肺組織臟器系數(shù)均高于對(duì)照組，在14d、21d、28d、60d有顯著性差異(P＜0.01)。與染矽塵組比較，GcAE組肺組織臟器系數(shù)在14d、21d、28

5、d、60d時(shí)顯著降低(P＜0.05)，TT組在14d、28d、60d時(shí)顯著降低(P＜0.05)。 2與對(duì)照組比較，不同時(shí)間點(diǎn)染矽塵組大鼠血漿SOD及GSH-PX活力變化相似：除在7d時(shí)略高外，其余各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均降低。SOD在14d、21d、28d、60d顯著降低(P＜0.05)，GSH-PX在14d、21d、28d顯著降低((P＜0.05)，其中14d時(shí)陡然下降到最低(P＜0.01)然后開(kāi)始緩慢增加。與染矽塵組比較，GcAE組及T

6、T組大鼠血漿SOD及GSH-PX活力從14d開(kāi)始均不同程度地增高，在14d、21d、28d時(shí)有顯著性差異(P＜0.05)。 3與對(duì)照組比較，染矽塵組大鼠各時(shí)間點(diǎn)血漿MDA含量顯著升高，其中7d、14d、21d、28d時(shí)P＜0.01，60d時(shí)P＜0.05。 GcAE組及TT組大鼠各時(shí)間點(diǎn)血漿MDA含量均低于染矽塵組，其中7d、14d、21d、28d時(shí)有顯著性差異(P＜0.05)。 4染矽塵大鼠各時(shí)間BALF中總NO

7、S活力均高于對(duì)照組，有顯著性差異(P＜0.01)，其中14d時(shí)達(dá)到高峰。與染矽塵組比較，GcAE組及TT組大鼠各時(shí)間BALF中總NOS活力均降低，在14d、21d、28d時(shí)有顯著性差異(P＜0.05)。 5與對(duì)照組比較，染矽塵大鼠各時(shí)間BALF中iNOS活力顯著增加，在14d時(shí)增加達(dá)到高峰，于7d、14d、21d、28d時(shí)有顯著性差異(P＜0.05)。與染矽塵組比較，GcAE組及TT組大鼠各時(shí)間點(diǎn)BALF中iNOS活力均降低，其

8、中，GcAE組在7d、14d、21d、28d時(shí)有顯著性差異(P＜0.05)，TT組在14d、21d、28d時(shí)有顯著性差異(P＜0.05)。 6與對(duì)照組比較，染矽塵大鼠各時(shí)間點(diǎn)BALF中NO含量增加，其中7d、14d、21d時(shí)有顯著性差異(P＜0.05)。GcAE組及TT組大鼠各時(shí)間點(diǎn)BALF中NO含量較染矽塵組均有所降低，其中7d、14d、21d時(shí)有顯著性差異(P＜0.05)。 7與對(duì)照組比較，染矽塵組大鼠肺組織各時(shí)間點(diǎn)

9、iNOS陽(yáng)性細(xì)胞面密度均增加，21d時(shí)達(dá)到高峰，此后開(kāi)始下降，7d、14d、21d、28d時(shí)有顯著性差異(P＜0.05)。GcAE組及TT組大鼠肺組織各時(shí)間點(diǎn)iNOS陽(yáng)性細(xì)胞面密度均低于染矽塵組，在14d、21d時(shí)有顯著性差異(P＜0.05)。 8與對(duì)照組比較，Ⅰ型膠原呈直線上升趨勢(shì)，在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均有顯著性差異(P＜0.05)，而Ⅲ型膠原在21d時(shí)上升陡然趨緩，僅在7d、14d、21d時(shí)有顯著性差異(P＜0.05)。GcAE及T