大鼠神經(jīng)干細(xì)胞向多巴胺能神經(jīng)元定向分化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景與目的 神經(jīng)干細(xì)胞(neuralstemcell，NSC)是近年來(lái)神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。NSC是具有多向分化潛能和自我更新的能力細(xì)胞，NSC的增殖分化為神經(jīng)系統(tǒng)損傷和變性疾病的治療帶來(lái)了新希望。帕金森病(Parkinsondisease，PD)是多巴胺能神經(jīng)元減少或者消失導(dǎo)致的神經(jīng)系統(tǒng)病變，增加DA能神經(jīng)元是治療該疾病的一種策略，通過(guò)對(duì)NSC進(jìn)行體外誘導(dǎo)有望獲得足量的有效多巴胺能神經(jīng)元，為細(xì)胞移植治療研究打下基礎(chǔ)。本試

2、驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^(guò)用IL一1p、AA、IL—lp聯(lián)合AA誘導(dǎo)NSC分化生成多巴胺能神經(jīng)元，為深入研究NSC體外分化條件，探討誘導(dǎo)分化機(jī)制，提高DA能神經(jīng)元分化效能奠定細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)。 方法 分離培養(yǎng)新生(1日齡)SD大鼠中腦神經(jīng)干細(xì)胞，通過(guò)傳代培養(yǎng)擴(kuò)增來(lái)檢測(cè)自我更新能力；免疫學(xué)方法檢測(cè)NSC特異性標(biāo)志nestin蛋白表達(dá)和分化成為神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞能力。對(duì)NSC克隆進(jìn)行IL一1p、AA、IL一1p聯(lián)合AA(抗壞血酸)誘導(dǎo)分化，通過(guò)

3、免疫細(xì)胞學(xué)方法檢測(cè)多巴胺能神經(jīng)元標(biāo)志物酪氨酸羥化酶(tyrosinetydroxylase，TH)表達(dá)。 結(jié)果 培養(yǎng)細(xì)胞克隆均表達(dá)nestin，分化細(xì)胞表達(dá)NSE和GFAP，體外培養(yǎng)10代細(xì)胞數(shù)目增加41倍；IL—lp、AA單獨(dú)誘導(dǎo)均提高TH陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)，與血清對(duì)照組比較有顯著性差異(P<0．05)，IL一1p聯(lián)合AA與單獨(dú)應(yīng)用IL一1p組比較能夠顯著提高TH陽(yáng)性細(xì)胞率，二者有顯著性差異(P<0．05)。 結(jié)論