Crigler-Najjar綜合征Ⅱ型UGT1A1基因突變分析.pdf

1、背景
　　Crigler-Najjar綜合征(CNS)為罕見的膽紅素代謝障礙性疾病，分為Ⅰ和Ⅱ兩型，由尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉移酶1A1基因(UGT1A1)突變使其酶活性完全或部分缺陷所致。尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉移酶(UDPGT)是一組主要分布于肝細胞的同工酶家族，其中UGT1A1是唯一作用于膽紅素代謝的同工酶[1~3]。UGT1A1基因突變可引起酶結構及功能異常，使膽紅素代謝不足而導致高非結合膽紅素血癥。與UGT1A1突變有關的遺

2、傳性非溶血性高非結合膽紅素血癥有3種[4]，根據(jù)臨床嚴重程度分為Crigler-Najjar綜合征Ⅰ型(CN-Ⅰ)：血清膽紅素值波動于340～850μmol/L之間，常死于膽紅素腦?。籆rigler-Najjar綜合征Ⅱ型(CN-Ⅱ)：膽紅素血癥較Ⅰ型輕，膽紅素波動于85～340μmol/L之間，新生兒期之后，膽紅素血癥很少危害到患兒健康[5]；Gilbert綜合征(GS)：膽紅素血癥最輕，膽紅素介于正常值～85μmol/L之間，一般不

3、會威脅到患兒健康。CN-Ⅱ為UGT1A1酶部分缺陷所致，典型癥狀為高非膽紅素血癥，血清總膽紅素濃度波動于85～340μmol/L之間，但無溶血和肝臟疾患，苯巴比妥治療有效，及時正規(guī)治療一般無膽紅素腦病發(fā)生[2]，但是當沒有早期發(fā)現(xiàn)此病和缺乏強化治療，將不僅僅對新生兒期患者對成人期患者都是致命的。膽紅素對神經細胞敏感，毒性強，特別是對新生兒腦組織尤為敏感，導致膽紅素腦病發(fā)生，且青春期和成人期也可發(fā)生。CNS發(fā)病率為百萬分之一，常染色體隱性

4、遺傳報道較多，常染色體顯性遺傳也有報道，且外顯率不完全，表現(xiàn)型有差異。分子遺傳學診斷簡易、快速，患者易于接受，且診斷CNS首選方法為基因突變分析。CN-Ⅱ患者UGT1A1基因突變于第1-5外顯子編碼區(qū)均可見，有純合錯義突變、復合雜合突變、框移突變、無義突變或是在錯義突變中TA插入啟動子區(qū)，其中以純合錯義突變及復合雜合突變多見[6-9]，主要基因型之一為G71R和Y486D突變，以東亞地區(qū)報道最多，而這種突變在白種人及非洲人中罕見。

5、>　　目的
　　確定一例Crigler-Najjar綜合征Ⅱ型患兒的UGT1A1基因突變，有助于此病的診斷及早期治療提供依據(jù)；初步分析CN-Ⅱ基因型和表型之間的關系，為CN-Ⅱ分子病因學研究提供數(shù)據(jù)，并為CN-Ⅱ患者的基因診斷和遺傳咨詢提供資料。
　　方法
　　采集先證者及其家系成員和50名無血緣關系健康對照者外周血，采用經典Miller蛋白酶K-氯化鈉高鹽析法提取外周血白細胞基因組DNA，應用聚合酶鏈式反應（PCR）

6、和DNA直接測序技術對先證者進行UGT1A1基因突變位點檢測。參閱國內外已有研究及報道，初步分析CN-Ⅱ基因型和表型之間的關系。
　　結果
　　1.先證者UGT1A1基因檢測出復合雜合突變（G71R/Y486D）；
　　2.先證者第1外顯子檢測出211位G>A雜合突變，導致所編碼的第71位甘氨酸變?yōu)榫彼幔℅ly>Arg,G71R），母親及父親均檢出這一雜合突變；
　　3.先證者第5外顯子檢測出1456位T>G

7、雜合突變，導致所編碼的第486位酪氨酸變?yōu)樘扉T冬氨酸（Tyr>Asp,Y486D），父親檢測出這一雜合突變，母親未檢測出該突變；
　　4.本研究所檢測出的基因變異均為熱點突變。
　　結論
　　1.臨床上高度懷疑Crigler-Najjar綜合征時，使用分子遺傳學方法快速明確診斷，可以為本患兒家庭提供遺傳咨詢及產前診斷；
　　2.本研究先證者UGT1A1突變存在G71R/Y486D突變，與亞洲報道的熱點突變一致，說