早老病與擴(kuò)心病的LMNA基因的突變研究.pdf

1、一、早老病患者的LMNA基因突變篩查
　　 早老綜合癥(Hutchinson-Gilford progeria syndrome，HGPS，OMIM176670)，又簡稱早老病，是一種極為罕見的、早發(fā)并且嚴(yán)重的過早老化性疾病，其主要的臨床特征表現(xiàn)為身材矮小、體重低、早期脫發(fā)、脂肪營養(yǎng)障礙、硬皮病、關(guān)節(jié)可動性降低、家族性肢端骨質(zhì)溶解和老年人面容。早老病多始發(fā)于一歲之內(nèi)，兩歲之后才能做出診斷，平均存活年齡為13.4歲，一般存活年齡在

2、7歲到27歲之間，極少數(shù)能活到45歲，心腦血管疾病是早老病主要的死因。早老病患者多為兒童，研究報(bào)道在全世界范圍內(nèi)發(fā)病率為1/4000000～1/8000000。男性多發(fā)于女性，比例大約為1.5∶1。目前，國內(nèi)尚無早老病發(fā)病率的相關(guān)報(bào)道。
　　 研究結(jié)果表明，早老病的發(fā)生與LMNA基因的突變有關(guān)。LMNA基因突變可以引起一系列核纖層蛋白異常變化，從而引發(fā)相關(guān)的核纖層蛋白疾病，比如早老病、擴(kuò)心病等。LMNA基因不同的突變會引起不同患

3、者表現(xiàn)出相似的疾病表型。此外，同一個基因突變又可引起不同患者表現(xiàn)出不同的疾病表型。中國人群早老病患者與LMNA基因的突變篩查研究極少，而不同種族的遺傳易感因素存在著很大的差別，因此，對中國漢族早老病患者及其家系進(jìn)行LMNA基因的突變篩查，有助于了解在中國漢族人群中LMNA基因的變異與早老病的關(guān)系。
　　 為了闡明中國漢族人群早老病的遺傳基礎(chǔ)，本研究收集了1個中國漢族早老病家系和100個正常對照，采用PCR擴(kuò)增和直接測序的方法分析

4、該早老病家系所有成員與正常對照的LMNA基因序列，尋找與該早老病家系相關(guān)的LMNA基因突變。
　　 本研究在1個早老病家系的所有成員中檢測到位于LMNA基因的變異c.1579C＞T，該變異引起的第527位的精氨酸改變?yōu)榘腚装彼?p.R527C)，其中先證者及其弟弟為LMNA c.1579C＞T的純合改變，父母親均為LMNA c.1579C＞T的雜合改變;在100例正常對照中未檢測到LMNA基因的突變。
　　 本研究表明該

5、早老病家系患者系LMNA基因的純合突變p.R527C所致。
　　 二、擴(kuò)張性心肌病患者的LMNA基因突變篩查
　　 擴(kuò)張型心肌病(Dilated cardiomyopathy，DCM，OMM115200)是以心臟擴(kuò)張和收縮功能障礙為典型特征的一類遺傳高度異質(zhì)性、臨床多樣性的疾病，是心肌疾病中最常見的一種類型。其臨床特征主要表現(xiàn)為心力衰竭、猝死、心律紊亂和血栓栓塞。擴(kuò)張型心肌病起病相對緩慢，男性多發(fā)于女性（男∶女=2.5∶

6、1），群體的發(fā)病年齡在20～50歲之間，而個體發(fā)病年齡日益趨于年輕化，5年病死率為15％～50％，生存率不到50％。DCM主要呈散發(fā)性，歐美地區(qū)相關(guān)資料統(tǒng)計(jì)DCM每年的發(fā)病率大約為7/100000。在日本，特發(fā)性擴(kuò)張型心肌病(Idiopathic dilated cardiomyopathy，iDCM)的發(fā)病率相對較低，約為1.2/100000。在中國，1992年南京市的一項(xiàng)調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)DCM的發(fā)病率約為1.3/10000。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，

7、近年來DCM的發(fā)病率在國內(nèi)外均有上升趨勢，該病仍然是世界上心血管疾病的一大難題。目前，DCM的病因及確切的發(fā)病機(jī)制尚未闡明，但是，分子遺傳學(xué)研究表明DCM的發(fā)生與遺傳因素明顯相關(guān)，約35％的DCM患者呈家族性遺傳，現(xiàn)研究已發(fā)現(xiàn)27個染色體位點(diǎn)上的43個突變基因與DCM有關(guān)，其中32個基因與常染色體顯性遺傳的家族性擴(kuò)張型心肌病(Familial dilated cardiomyopathy，F(xiàn)DCM)的發(fā)生有關(guān)，LMNA基因是FDCM伴傳

8、導(dǎo)阻滯的致病基因。目前文獻(xiàn)報(bào)道的能引起DCM發(fā)生的LMNA基因突變包括R60G, L85R，K97E，ElllX，E161K，Argl90Trp, N195K, E203G, E317K, R377H, L59R, S573L, Glu53Val,Glu186Lys等，這些突變分布在所有12個外顯子上。
　　 本課題組前期初步完成了一個擴(kuò)心病家系的候選基因定位與克隆研究，為了進(jìn)一步探討中國漢族人群DCM發(fā)生的遺傳基礎(chǔ)，2009年

9、-2011年，我室與中南大學(xué)湘雅醫(yī)院合作收集了1個擴(kuò)張型心肌病家系和31個散發(fā)的擴(kuò)心病患者，利用PCR擴(kuò)增和sanger直接測序的方法對LMNA基因進(jìn)行突變檢測分析，尋找與DCM相關(guān)的新發(fā)突變，為更好地預(yù)防、診斷和治療DCM奠定良好的研究基礎(chǔ)。
　　 本研究通過對1個DCM家系內(nèi)的所有患者和31個散發(fā)的DCM患者進(jìn)行了LMNA基因突變篩查，發(fā)現(xiàn)了8個變異，與dbSNP數(shù)據(jù)庫相比對，其中c.(-)212 t＞c、 c.*319 a