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文檔簡介
1、第一部分:對雷公藤治療的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病人生活質(zhì)量和療效的評價(jià)目的:以甲氨喋呤(MTX)為對照,觀察接受雷公藤治療的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的生活質(zhì)量和療效,旨在科學(xué)地評價(jià)雷公藤在治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的作用。 方法:80例活動(dòng)性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者按按1:1比例隨機(jī)分入雷公藤組和MTX組,分別服用雷公藤片6片/天,MTX10mg/周,共12周,所有病人在治療前后測定臨床指標(biāo)及填寫類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎生活質(zhì)量量表。 結(jié)果:74例病人完成治療,雷
2、公藤組總有效率為84.2%,副反應(yīng)發(fā)生率為25.6%,MTX組總有效率為86.6%,副反應(yīng)發(fā)生率為22.2%,兩組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;雷公藤能明顯提高患者生活質(zhì)量,但與MTX比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論:雷公藤治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎療效肯定,并且能改善患者生活質(zhì)量。 第二部分:雷公藤內(nèi)酯醇對膠原誘導(dǎo)的大鼠關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)腔和外周血清中細(xì)胞因子的影響 目的:觀察雷公藤內(nèi)酯醇對Ⅱ型膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎(CIA)大鼠外周血清和關(guān)節(jié)炎腔中
3、IL-6、IL-10、TNF-α的影響,探討雷公藤內(nèi)酯醇治療CIA的可能機(jī)制。 方法:以膠原誘導(dǎo)的Wistar大鼠關(guān)節(jié)炎為動(dòng)物模型,將造模成功的20只大鼠隨機(jī)分為模型組和雷公藤內(nèi)酯醇組。雷公藤內(nèi)酯醇按4μg/100gBW,肌注給藥,每3天1次,31天處死動(dòng)物,采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測大鼠血清和膝關(guān)節(jié)腔液中TNF-α、IL-6和IL-10含量。 結(jié)果:與正常對照組大鼠相比,CIA模型大鼠關(guān)節(jié)腔液和血清中TNF-
4、α、IL-6含量升高IL-10含量降低(P<0.01),經(jīng)過雷公藤內(nèi)酯醇治療后,關(guān)節(jié)腔液和血清中TNF-α、IL-6含量降低,IL-10含量升高(模型組與治療組相比,P<0.01)。 結(jié)論:雷公藤內(nèi)酯醇可能通過調(diào)節(jié)細(xì)胞因子變化而達(dá)到治療CIA,這也可能是雷公藤治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的機(jī)制之一。 第三部分:雷公藤內(nèi)酯醇對膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎大鼠關(guān)節(jié)局部熱休克蛋白和MHC-Ⅰ類分子表達(dá)的影響 目的:觀察雷公藤內(nèi)酯醇對膠原誘導(dǎo)的
5、關(guān)節(jié)炎大鼠關(guān)節(jié)局部熱休克蛋白(HSPs)和主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類分子(MHC-Ⅰ)表達(dá)的影響,初步探討雷公藤甲素的藥理作用是否與影響這些分子的表達(dá)有關(guān)。 方法:通過建立CIA大鼠模型,將雷公藤內(nèi)酯醇按劑量4μg/100g體重肌注給藥,雷公藤內(nèi)酯醇按4μg/100gBW,肌注給藥,每3天1次,31天處死動(dòng)物,運(yùn)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)觀察大鼠關(guān)節(jié)滑膜和軟骨細(xì)胞HSP60mRNA和HSP70mRNA的表達(dá);運(yùn)用免疫組織
6、化學(xué)染色的方法,觀察大鼠關(guān)節(jié)滑膜和軟骨細(xì)胞HSP60、HSP70和MHC-Ⅰ類分子蛋白的表達(dá)情況。 結(jié)果:與正常對照組相比,CIA模型大鼠關(guān)節(jié)滑膜及軟骨細(xì)胞HSP60、HSP70和MHC-Ⅰ類分子的表達(dá)均顯著增高(P<0.05),與模型組相比,雷公藤內(nèi)酯醇可以下調(diào)CIA大鼠關(guān)節(jié)局部上述分子的表達(dá)(P<0.05)。 結(jié)論:降低關(guān)節(jié)炎局部軟骨和滑膜細(xì)胞異常表達(dá)的HSPs與MHC分子,可能是雷公藤內(nèi)酯醇治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)
7、制之一。 第四部分:雷公藤內(nèi)酯醇對Ⅱ型膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎大鼠外周血γδT細(xì)胞的影響 目的:觀察雷公藤內(nèi)酯醇對Ⅱ型膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎大鼠外周血γδT細(xì)胞比率的變化和凋亡情況,探討雷公藤內(nèi)酯醇治療CIA的可能機(jī)制。 方法:以膠原誘導(dǎo)的Wistar大鼠關(guān)節(jié)炎為動(dòng)物模型,將造模成功的20只大鼠隨機(jī)分為模型組和雷公藤內(nèi)酯醇組。雷公藤內(nèi)酯醇按4μg/100gBW,肌注給藥,每3天1次,31天處死動(dòng)物,運(yùn)用直接免疫熒光法測定γδT
8、細(xì)胞比率,流式細(xì)胞儀測定γδT細(xì)胞凋亡率。 結(jié)果:與正常對照組比較,CIA模型組外周血中γδT細(xì)胞比率明顯下降,凋亡率升高,P<0.01,經(jīng)雷公藤內(nèi)酯醇治療后,γδT細(xì)胞比率恢復(fù),接近正常對照組,兩組比較,P>0.05。 結(jié)論:調(diào)節(jié)CIA大鼠外周血γδT細(xì)胞比率,減少γδT細(xì)胞其凋亡,可能是雷公藤內(nèi)酯醇治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的機(jī)制之一。 第五部分:雷公藤內(nèi)酯醇誘導(dǎo)膠原導(dǎo)致的關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜細(xì)胞凋亡的研究 目的:以
9、膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎為動(dòng)物模型,探討雷公藤內(nèi)酯醇能否誘導(dǎo)CIA大鼠滑膜細(xì)胞凋亡。 方法:選用雄性Wistar大鼠造模,將造模成功的大鼠隨機(jī)分為模型組和雷公藤甲素組。雷公藤內(nèi)酯醇按4μg/100gBW,肌注給藥,每3天1次。凋亡檢測:給藥31天后處死,取膝關(guān)節(jié)滑膜。作蘇木素-伊紅染色(HE)、電鏡、缺口末端標(biāo)記法(TUNEL)標(biāo)記及流式細(xì)胞儀檢測。 結(jié)果:電鏡下可見早期階段的滑膜凋亡細(xì)胞。流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示:正常組、模型組
10、、雷公藤內(nèi)酯醇組的凋亡細(xì)胞分別為(0.87±0.24)%、(1.83±0.82)%和(3.98±1.16)%。正常組、模型組、雷公藤內(nèi)酯醇組的S期細(xì)胞分別為(3.4±0.7)%、(8.0±1.4)%和(3.3±1.2)%。雷公藤內(nèi)酯醇組與模型組比較差異均顯著(P<0.01)。TUNEL標(biāo)記結(jié)果顯示:正常組、模型組、雷公藤內(nèi)酯醇組的凋亡細(xì)胞分別為(1.0±0.4)%、(2.2±1.0)%和(4.5±0.9)%,雷公藤內(nèi)酯醇組與模型組的差異
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