大鼠腦梗死后腦組織損傷和腦梗面積與凋亡調節(jié)蛋白、TNF-α、GFAP、BDNF、Nestin、NSE的表達.pdf

1、目的:
　　探討大鼠大腦中動脈缺血再灌注(modified neurological severity scores，MCAO)不同時間梗死部位組織學和梗死面積，以及神經功能與凋亡調節(jié)蛋白，炎癥及神經營養(yǎng)因子表達，神經及膠質細胞再生等變化在腦梗死中的關系及意義，以期為臨床腦保護劑的應用提供實驗依據。
　　方法:
　　1、線栓法制作大鼠MCAO模型，并隨機分為模型1d、3d、7d、14d、21d組。
　　2、采用m

2、NSS評分法對MCAO模型大鼠進行神經功能評價。
　　3、HE染色觀察組織形態(tài)變化及腦梗死面積的變化。
　　4、免疫組化觀察Bcl-2、Bax、GFAP、NSE、BDNF、Nestin和TNF-α的表達。
　　結果:
　　1、MCAO后第3d皮質水腫、神經元結構模糊但胞核仍清晰可見，基底節(jié)區(qū)神經纖維腫脹、星形膠質細胞增多;第7d皮質神經元軸突減少甚至消失且核仁模糊、小膠質細胞出現且噬神經，基底節(jié)區(qū)神經纖維崩解、小

3、膠質細胞增多;第14d神經元結構不清晰，基底節(jié)區(qū)布滿小膠質細胞;第21d神經元結構模糊，基底節(jié)區(qū)小膠質細胞更多且出現纖維結締組織、缺血核心區(qū)形成空白區(qū)。
　　2、MCAO后腦梗死面積隨著時間的遷移逐漸增大，梗死區(qū)域由基底節(jié)區(qū)擴展至缺血半暗帶直達皮質區(qū)，其中模型21d組顯著大于模型1d組、模型3d組、模型7d組，模型14d組顯著大于模型1d～模型7d組，模型7d組顯著大于模型1d組。
　　3、MCAO后神經功能評分(mNSS)

4、隨時間的推移逐漸下降，其中模型21d組顯著小于模型1d組(P＜0.05)。
　　4、MCAO后Bax陽性著色區(qū)域主要為皮質及梗死側基底節(jié)區(qū)細胞漿和細胞膜，隨著時間的推移陽性細胞的細胞核由清晰變?yōu)槟：詈笙?，其IOD值也隨著時間的推移而逐漸下降并在21天達最低值，其中模型21d組顯著小于模型1d組、模型3d組、模型7d組、模型14d組(P＜0.05); Bcl-2+陽性細胞主要分布于皮質及缺血半暗帶區(qū)域細胞漿和細胞膜，隨著時間的遷

5、移陽性細胞逐漸增加，其中模型1d組、3d組顯著小于模型14d組和模型21d組，模型7d顯著小于模型21d組。
　　5、MCAO后TNF-α表達模型1d組～模型7d組逐漸增加并達高峰。
　　6、MCAO后GFAP+細胞主要聚集在梗死區(qū)周圍，隨著時間的推移GFAP陽性細胞數量呈雙向反應，模型1d組、模型3d組、模型7d組逐步升高、而至模型14d組和模型21d組則又逐步降低，其中模型7d組顯著高于模型1d組、模型3d組(P＜0.0

6、5)。
　　7、MCAO后BDNF+細胞著色主要位于胞漿和細胞膜表面胞漿，其IOD值呈雙向表達，模型1d組、模型3d組、模型7d組、模型14d組表達逐步降低，模型21d表達升高，其中模型1d組和模型21d組顯著大于模型14d組(P＜0.05)。
　　8、MCAO后Nestin+細胞數量隨著時間的推移呈雙向反應，第1d組～7d組逐步升高，隨后逐步降低，其中模型7d組顯著高于模型1d組、模型3d組(P＜0.05)。
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7、、MCAO后NSE IOD隨著時間的延長逐漸上升，其中模型1d組顯著小于模型3d組、模型7d組、模型14d組、模型21d組，模型21d組顯著大于模型3d組、模型7d組(P＜0.05)。
　　結論:
　　MCAO后14d前首先炎癥反應加劇并導致細胞凋亡和膠質細胞增生，然后開始啟動修復神經干細胞增殖、分化;14d后雖然腦梗死面積和腦組織損傷仍然在增加，但由于抗細胞凋亡顯著增強及神經營養(yǎng)因子產生增加致使部分缺血/缺氧的神經細胞（缺