大鼠腦梗死后腦組織損傷和腦梗面積與凋亡調(diào)節(jié)蛋白、TNF-α、GFAP、BDNF、Nestin、NSE的表達(dá).pdf

1、目的:
　　探討大鼠大腦中動(dòng)脈缺血再灌注(modified neurological severity scores，MCAO)不同時(shí)間梗死部位組織學(xué)和梗死面積，以及神經(jīng)功能與凋亡調(diào)節(jié)蛋白，炎癥及神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子表達(dá)，神經(jīng)及膠質(zhì)細(xì)胞再生等變化在腦梗死中的關(guān)系及意義，以期為臨床腦保護(hù)劑的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:
　　1、線栓法制作大鼠MCAO模型，并隨機(jī)分為模型1d、3d、7d、14d、21d組。
　　2、采用m

2、NSS評(píng)分法對(duì)MCAO模型大鼠進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)價(jià)。
　　3、HE染色觀察組織形態(tài)變化及腦梗死面積的變化。
　　4、免疫組化觀察Bcl-2、Bax、GFAP、NSE、BDNF、Nestin和TNF-α的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1、MCAO后第3d皮質(zhì)水腫、神經(jīng)元結(jié)構(gòu)模糊但胞核仍清晰可見，基底節(jié)區(qū)神經(jīng)纖維腫脹、星形膠質(zhì)細(xì)胞增多;第7d皮質(zhì)神經(jīng)元軸突減少甚至消失且核仁模糊、小膠質(zhì)細(xì)胞出現(xiàn)且噬神經(jīng)，基底節(jié)區(qū)神經(jīng)纖維崩解、小

3、膠質(zhì)細(xì)胞增多;第14d神經(jīng)元結(jié)構(gòu)不清晰，基底節(jié)區(qū)布滿小膠質(zhì)細(xì)胞;第21d神經(jīng)元結(jié)構(gòu)模糊，基底節(jié)區(qū)小膠質(zhì)細(xì)胞更多且出現(xiàn)纖維結(jié)締組織、缺血核心區(qū)形成空白區(qū)。
　　2、MCAO后腦梗死面積隨著時(shí)間的遷移逐漸增大，梗死區(qū)域由基底節(jié)區(qū)擴(kuò)展至缺血半暗帶直達(dá)皮質(zhì)區(qū)，其中模型21d組顯著大于模型1d組、模型3d組、模型7d組，模型14d組顯著大于模型1d～模型7d組，模型7d組顯著大于模型1d組。
　　3、MCAO后神經(jīng)功能評(píng)分(mNSS)

4、隨時(shí)間的推移逐漸下降，其中模型21d組顯著小于模型1d組(P＜0.05)。
　　4、MCAO后Bax陽(yáng)性著色區(qū)域主要為皮質(zhì)及梗死側(cè)基底節(jié)區(qū)細(xì)胞漿和細(xì)胞膜，隨著時(shí)間的推移陽(yáng)性細(xì)胞的細(xì)胞核由清晰變?yōu)槟：詈笙?，其IOD值也隨著時(shí)間的推移而逐漸下降并在21天達(dá)最低值，其中模型21d組顯著小于模型1d組、模型3d組、模型7d組、模型14d組(P＜0.05); Bcl-2+陽(yáng)性細(xì)胞主要分布于皮質(zhì)及缺血半暗帶區(qū)域細(xì)胞漿和細(xì)胞膜，隨著時(shí)間的遷

5、移陽(yáng)性細(xì)胞逐漸增加，其中模型1d組、3d組顯著小于模型14d組和模型21d組，模型7d顯著小于模型21d組。
　　5、MCAO后TNF-α表達(dá)模型1d組～模型7d組逐漸增加并達(dá)高峰。
　　6、MCAO后GFAP+細(xì)胞主要聚集在梗死區(qū)周圍，隨著時(shí)間的推移GFAP陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量呈雙向反應(yīng)，模型1d組、模型3d組、模型7d組逐步升高、而至模型14d組和模型21d組則又逐步降低，其中模型7d組顯著高于模型1d組、模型3d組(P＜0.0

6、5)。
　　7、MCAO后BDNF+細(xì)胞著色主要位于胞漿和細(xì)胞膜表面胞漿，其IOD值呈雙向表達(dá)，模型1d組、模型3d組、模型7d組、模型14d組表達(dá)逐步降低，模型21d表達(dá)升高，其中模型1d組和模型21d組顯著大于模型14d組(P＜0.05)。
　　8、MCAO后Nestin+細(xì)胞數(shù)量隨著時(shí)間的推移呈雙向反應(yīng)，第1d組～7d組逐步升高，隨后逐步降低，其中模型7d組顯著高于模型1d組、模型3d組(P＜0.05)。
　　9

7、、MCAO后NSE IOD隨著時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸上升，其中模型1d組顯著小于模型3d組、模型7d組、模型14d組、模型21d組，模型21d組顯著大于模型3d組、模型7d組(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　MCAO后14d前首先炎癥反應(yīng)加劇并導(dǎo)致細(xì)胞凋亡和膠質(zhì)細(xì)胞增生，然后開始啟動(dòng)修復(fù)神經(jīng)干細(xì)胞增殖、分化;14d后雖然腦梗死面積和腦組織損傷仍然在增加，但由于抗細(xì)胞凋亡顯著增強(qiáng)及神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子產(chǎn)生增加致使部分缺血/缺氧的神經(jīng)細(xì)胞（缺