抗胃癌MGr1單鏈抗體和MGb2單域抗體的制備及活性檢測.pdf

1、第四軍醫(yī)大學博士學位論文抗胃癌MGr1單鏈抗體和MGb2單域抗體的制備及活性檢測姓名：安華章申請學位級別：博士專業(yè)：內(nèi)科學(消化系病)指導教師：樊代明2000.6.1笫心車陵大學糟j一論文二吏守破下面i’交蘭《豇爵，。實驗一，MGr。單鏈抗體的制備及其生物學活性的初步研究(摘要)＼|f博士研究生安華章，7＼導師樊代明j將抗體用于腫瘤的診治是醫(yī)學研究的重要課題之一?？葱匀贵w分子用于人體的主要障礙是容易引起人抗小鼠抗體反應和過敏反應，而

2、人抗體的制備仍存在一些難以克服的困難。因此，有必要對鼠源性抗體進行改進以利于鼠源性抗體在人體內(nèi)的應用。與親本抗體相比，利用基因工程技術制備的單鏈抗體具有免疫原性弱、組織穿透性強、易于大量制備、遺傳背景穩(wěn)定并容易進行改造等優(yōu)點，更適于在體內(nèi)的應用。胃癌是我國發(fā)病率最高的惡性腫瘤。由于多藥耐藥性的產(chǎn)生，胃癌對化療的敏感性較低，目前臨床上尚無有效的解決方法。MGr。單克隆抗體可識別胃癌細胞耐藥相關抗原，在體外實驗中能部分逆轉(zhuǎn)胃癌耐藥細胞多藥耐

3、藥性≯為了獲得MGr單抗的遺傳背景，促進其在體內(nèi)實驗及臨床上的應用，我們克隆了MGrmAb的可變區(qū)基因，并制備了MGr單鏈抗體scFvGr，f(1)利用RTPCR方法以MGrl雜交瘤細胞總RNA為模板擴增MGr。＼mAb重鏈和輕鏈可變區(qū)基因(Gr。V。，Gr。V。)，雙脫氧鏈末端終止法對GrV。和Gr。VL進行測序，利用計算機軟件推導Gr，V。和Gr，V。編碼的氨基酸序列并進行同源性分析，結(jié)果表明，GrvH、Grv。均為新的抗體可變區(qū)基