鼻腔滴注白細胞介素-22對小鼠變應性鼻炎的緩解作用.pdf

1、第一部分鼻腔滴注白細胞介素-22對小鼠變應性鼻炎的緩解作用
　　目的：探討鼻腔滴注重組小鼠白細胞介素-22（recombination murine interleukin-22/rm-IL-22）對小鼠變應性鼻炎免疫應答的調節(jié)作用。
　　方法：將24只6~8周的雌性BALB/c小鼠隨機分為3組，每組8只，分別為對照組、模型組和IL-22組。模型組和IL-22組建立小鼠變應性鼻炎模型，同時IL-22組在每次激發(fā)前鼻腔滴注rm

2、-IL-22。首先應用間接免疫熒光法檢測鼻黏膜上皮細胞是否表達IL-22受體（IL-22R1），最后一次激發(fā)后記錄三組小鼠10分鐘的抓撓數(shù)和噴嚏數(shù)，應用酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）檢測外周血清中卵白蛋白-特異性IgE（OVA-sIgE）的濃度，檢測鼻腔灌洗液中干擾素-γ（IFN-γ）、白細胞介素-4（IL-4）、白細胞介素-5（IL-5）、白細胞介素-10（IL-10

3、）和胸腺基質淋巴細胞生成素（thymic stromal lymphopoietin, TSLP）的濃度，HE染色觀察鼻黏膜局部嗜酸性粒細胞浸潤情況。最后利用SPSS17.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結果：IL-22R1在小鼠鼻黏膜上皮細胞表達，IL-22組較模型組小鼠變應性鼻炎抓撓和噴嚏癥狀減輕，鼻腔灌洗液中IL-4、IL-5和外周血清中OVA-sIgE的濃度較模型組降低，局部嗜酸性

4、粒細胞數(shù)侵潤減少，三組間差異有統(tǒng)計學意義，鼻腔灌洗液中IFN-γ、IL-10和TSLP的濃度在IL-22組和模型組間差異無統(tǒng)計學意義。
　　結論：鼻腔滴注rm-IL-22可以抑制變應性鼻炎小鼠的免疫應答，有望成為治療變應性鼻炎的一種新方法。
　　第二部分三種重組腺相關病毒載體轉導增強綠色熒光蛋白在小鼠鼻黏膜的表達
　　目的：探討重組1、2和8型腺相關病毒（rAAV1、rAAV2和rAAV8）載體經(jīng)小鼠鼻腔滴注轉導增強綠

5、色熒光蛋白（EGFP）基因在鼻黏膜上皮細胞的表達情況。
　　方法：6只6~8周的雌性BALB/c小鼠隨機分為3組，每組2只。用帶有EGFP基因的重組1、2和8型腺相關病毒進行小鼠鼻腔滴注，第4周處死小鼠，獲得小鼠完整鼻腔，固定脫鈣后冰凍切片，然后在熒光顯微鏡下觀察EGFP在三組小鼠鼻黏膜上皮細胞的表達情況。
　　結果：rAAV1載體攜帶的EGFP成功轉染，第4周穩(wěn)定表達，另外兩型重組腺相關病毒攜帶的EGFP均未見在小鼠鼻黏膜