18F-ML-10評價腫瘤細(xì)胞凋亡的實驗研究.pdf

1、目的:利用順鉑誘導(dǎo)人肺腺癌A549細(xì)胞凋亡制作細(xì)胞凋亡模型;在肺腺癌A549細(xì)胞化療模型中，檢測18F-ML-10對凋亡細(xì)胞特異性的攝取水平;探討18F-ML-10在健康昆明小鼠中的生物學(xué)分布，在荷瘤小鼠行PET顯像觀察腫瘤部位攝取;并進(jìn)一步研究18F-ML-10在荷瘤小鼠抗癌治療中療效監(jiān)測的作用，評價其早期監(jiān)測抗癌治療后細(xì)胞凋亡的可行性。
　　方法:體外培養(yǎng)人肺腺癌A549細(xì)胞，經(jīng)不同濃度和不同時間順鉑作用后，通過Annexin

2、Ⅴ-FITC/PI定量法檢測A549細(xì)胞凋亡情況和井型Y探測儀測量18F-ML-10攝取水平;取健康昆明小鼠25只，隨機(jī)分組，在注射18F-ML-10后不同的時間點檢測小鼠各臟器的攝取水平，評價其生物學(xué)分布;利用人肺腺癌A549細(xì)胞異體移植至BALB/c裸鼠右前肢腋下皮下組織，建立荷瘤小鼠模型，在注射18F-ML-10后不同的時間點將荷瘤小鼠置于Micro-PET顯像，測量腫瘤部位的攝取水平;取荷瘤小鼠6只，隨機(jī)分成對照組和實驗組，實驗

3、組小鼠置于放療機(jī)上行腫瘤部位照射(5Gy)，待24h后注射18F-ML-10行PET顯像，觀察腫瘤部位18F-ML-10攝取水平。
　　結(jié)果:不同順鉑作用劑量導(dǎo)致A549細(xì)胞凋亡，順鉑濃度為10μg/ml時凋亡細(xì)胞百分比最小值為23.02±3.37％ VS對照組0.91±0.33％;順鉑濃度為100μg/ml最大值為37.31±2.48％ VS對照組0.91±0.33％，各組與對照組相比差異均有統(tǒng)計學(xué)意義;不同順鉑作用劑量導(dǎo)致A5

4、49凋亡細(xì)胞18F-ML-10攝取水平在順鉑濃度為10μg/ml時最小值為1.91±0.21 VS對照組0.07±0.02％ID/105，在順鉑濃度為100μg/ml時最大值為3.08±0.20 VS對照組0.07±0.02％ID/105，各組與對照組相比差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，A549凋亡細(xì)胞百分比和18F-ML-10攝取水平行線性回歸分析提示兩者線性相關(guān)。
　　不同順鉑作用時間導(dǎo)致A549細(xì)胞凋亡，在12h時凋亡細(xì)胞百分比最小值為

5、0.64±0.26 VS對照組1.61±0.61％，在48h時凋亡百分比最大值為63.10±14.00 VS對照組1.61±0.61％，各組與對照組相比差異均有統(tǒng)計學(xué)意義;不同順鉑作用時間A549凋亡細(xì)胞18F-ML-10攝取水平，在12h時最小值為0.07±0.01 VS對照組0.08±0.02％ID/105，在48h時最大值為4.97±1.03 VS對照組0.08±0.02％ID/105,各組與對照相比差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，A549凋

6、亡細(xì)胞百分比和18F-ML-10攝取水平行線性回歸分析提示兩者線性相關(guān)。
　　在昆明小鼠生物學(xué)分布檢測，18F-ML-10注射后在血液迅速達(dá)到最高濃度，并迅速分布至全身各個器官，主要通過腎臟從尿液中排出體外;荷瘤小鼠在注射18F-ML-10不同時間行PET顯像結(jié)果顯示腫瘤部位攝取水平在60min時間點達(dá)到最大值0.28±0.10％ID/g。荷瘤小鼠腫瘤部位放療后行PET顯像提示放療組腫瘤18F-ML-10值為1.25±0.13％I

7、D/g，T/M為5.95。
　　結(jié)論:不同順鉑作用劑量和作用時間在體外誘導(dǎo)人肺腺癌A549細(xì)胞凋亡，其凋亡百分比與劑量、時間成明顯依賴關(guān)系，18F-ML-10攝取率與凋亡細(xì)胞百分比之間有明顯的線性關(guān)系;經(jīng)順鉑誘導(dǎo)人肺腺癌A549細(xì)胞凋亡檢測18F-ML-10攝取率最佳時間為60-90min;18F-ML-10在昆明小鼠中有著良好的生物學(xué)分布，靜脈注射后能夠快速地分布到全身各個臟器，并在非靶向組織快速地清除;18F-ML-10在荷瘤