細胞凋亡pet探針39;18fsfbc2agst的合成及實驗研究

1、泰山醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文細胞凋亡PET探針F-SFB-C2A-GST的合成及實驗研究姓名：徐緒黨申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：影像醫(yī)學(xué)與核醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：劉林祥20090501及丫射線薄層色譜掃描儀檢測其放射化學(xué)純度。利用得到的1 8 F ．S F B 與經(jīng)2 ．亞氨基噻吩鹽酸鹽( 2 一I T ) 修飾和0 ．1 m o l ／1 P H值為7 ．4 的硼酸鹽緩沖液處理后的C 2 A ．G S T 融合蛋白在室溫下反應(yīng)，將純化的”F ．S F

2、B 的P B S 溶液加入已純化C 2 A ．G S T 融合蛋白，室溫下反應(yīng)3 0 分鐘獲得”F ．S F B ．C 2 A ．G S T 。最后通過聚丙烯酰胺凝膠柱分離純化1 8 F ．S F B ．C 2 A ．G S T 。取正常I C R 小鼠3 6 只，隨機分為6 組，自尾靜脈注射純化的0 ．1 ．O ．2 m l的生理鹽水注射液3 ．7M B q ，于注射后5 分鐘、3 0 分鐘、6 0 分鐘、1 2 0 分鐘、2 4 0

3、 分鐘分別斷頭處死解剖，測量心、肝、脾、胃、。腎、肺、腦、骨胳、血液、股骨、小腸等組織器官每克組織的百分注射劑量，并繪制時間一生物分布曲線；從而獲得1 8 F ．S F B ．C 2 A —G S T 在小鼠的正常生物分布數(shù)據(jù)；分別于注射1 8 F ．S F B ．C 2 A ．G S T 后5 分鐘、1 5 分鐘、6 0 分鐘、1 2 0 分鐘四個時相采集部分I C R 小鼠的M i c r o P E T 圖像，分析主要器官的分布及

4、代謝情況。結(jié)果 利用本研究方法獲得的1 8 F ．S F B 與標準品”F ．S F B 對照，在相同的H P L C 分析條件下，兩者在H P L C 柱上的保留時間基本吻合。標記后的重組蛋白1 8 F ．S F B ．C 2 A —G S T 放射化學(xué)純度大于9 5 ％，經(jīng)H P L C 分析其放射峰位與紫外色譜峰位一致，且其紫外色譜峰位與C 2 A ．G S T 紫外色譜峰位一致。合成的放射化學(xué)純度> 8 5 ％。生物分布顯

5、示墻F ．S F B ．C 2 A ．G S T 在小鼠腎組織、肝組織表現(xiàn)為高攝?。辉谄⒈憩F(xiàn)為明顯攝取，在肺組織早期攝取相對明顯但清除較快；在心肌、骨骼、腦等組織呈現(xiàn)低攝取。結(jié)論 本方法可以成功合成用于標記蛋白、多肽、抗體等生物活性分子的中間體1 8 F ．S F B 。1 8 F ．S F B 可以成功與C 2 A ．G S T 融合蛋白鰲合，實現(xiàn)C 2 A —G S T 融合蛋白的正電子核素標記( 分子探針合成) ，并可獲得滿意的放

6、射化學(xué)純度和體外穩(wěn)定性。1 8 F ．S F B ．C 2 A ．G S T 在生物體表現(xiàn)為明顯的組織攝取差異，主要通過肝腎代謝、清除，不能通過血腦屏障進入腦組織，將其應(yīng)用于肝、腎、腦等實質(zhì)組織的凋亡P E T 顯像受到限制；應(yīng)用于心肌、骨骼、肺等本底攝取低或清除速度較快的組織器官進行凋亡P E T 顯像的前景較好。關(guān)鍵詞 F 一；1 8 F ．S F B ；放射性合成；正電子發(fā)射計算機體層成像( P E T ) ；融合蛋白；C 2 A