RUNX2及Ⅵ型膠原蛋白在胸椎黃韌帶骨化中表達(dá)研究.pdf

1、目的：研究Runx2和Ⅵ型膠原在胸椎黃韌帶骨化組織及正常黃韌帶組織中的表達(dá)情況，并探討兩者在胸椎黃韌帶骨化進(jìn)程中的關(guān)系及各自的臨床意義。
　　 方法：將采集病例分為兩組，其中TOLF組（骨化黃韌帶組織取自TOLF患者）20例（男6例/女14例），年齡42-65歲，平均53歲;正常對(duì)照組（正常黃韌帶組織取自外傷致胸段或胸腰段椎體骨折及胸椎間盤突出患者）8例（男5例/女3例)，年齡18-65歲，平均47歲。采用HE染色方法對(duì)TOLF

2、組患者與正常人的胸椎黃韌帶中彈力纖維、膠原纖維形態(tài)變化進(jìn)行觀察，并對(duì)資料結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析;用免疫組織化學(xué)及免疫熒光方法對(duì)TOLF組患者與正常人胸椎黃韌帶中Runx2及Ⅵ型膠原的表達(dá)情況進(jìn)行觀察并對(duì)資料結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　 結(jié)果：
　　 1、HE染色在正常組中可見彈力纖維直徑大致相等，排列緊密而規(guī)則，其間有少量的膠原纖維和散在的成纖維細(xì)胞。在TOLF組中可見彈性纖維排列紊亂、數(shù)量減少，膠原纖維增加，可見成軟骨細(xì)胞和軟骨

3、細(xì)胞。正常組和TOLF組的成纖維細(xì)胞計(jì)數(shù)兩組比較有顯著性差異（t=9.399，P＜0.05）。
　　 2、免疫組化可見TOLF組中Runx2在軟骨細(xì)胞及成纖維細(xì)胞胞漿或胞核中均有較高表達(dá)，結(jié)果顯示Runx2在20例黃韌帶組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為100％，其中低表達(dá)(+)為5％(1/20)，中等表達(dá)(++)為35％(7/20)，強(qiáng)表達(dá)(+++)為60％(12/20);在正常組中的陽(yáng)性表達(dá)率為75％，其中無表達(dá)為25％(2/8)，低表達(dá)

4、(+)為75％(6/8)，無中等表達(dá)(++)及強(qiáng)表達(dá)(+++);Runx2在骨化組織中的表達(dá)水平明顯高于正常對(duì)照組織，表達(dá)陽(yáng)性率兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=23.80，P＜0.001)。Ⅵ型膠原陽(yáng)性信號(hào)主要定位于成纖維細(xì)胞及軟骨細(xì)胞的胞漿、胞膜及韌帶基質(zhì)中，結(jié)果顯示Ⅵ型膠原蛋白在20例黃韌帶組織中的陽(yáng)性表達(dá)率95％，其中無表達(dá)為5％(1/20)，低表達(dá)(+)為5％(1/20)，中等表達(dá)(++)為25％(5/20)，強(qiáng)表達(dá)(+++)為

5、65％(13/20);在8例正常黃韌帶組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為87.5％，其中無表達(dá)為12.5％(1/8)，低表達(dá)(+)為75％(6/8)，中等表達(dá)(++)12.5％(1/8)，無高表達(dá);Ⅵ型膠原蛋白在骨化組織中的表達(dá)水平明顯高于正常對(duì)照組織(x2=17.27，P＜0.001)。
　　 3、免疫熒光檢測(cè)結(jié)果:Runx2定位于軟骨細(xì)胞及成纖維細(xì)胞胞漿或胞核中，其表達(dá)在正常對(duì)照組(19.89±1.01)與TOLF組(58.73±1.36

6、)相比，組間比較存在顯著性差異(t=72.81，P＜0.001)，表達(dá)明顯低于骨化組;Ⅵ型膠原定位于成纖維細(xì)胞及軟骨細(xì)胞的胞漿、胞膜及韌帶基質(zhì)中，其表達(dá)TOLF組(64.74±0.89)與正常組（22.77±1.12）相比，組間比較存在顯著性差異(t=104.79，P＜0.001)，表達(dá)明顯高于正常對(duì)照組。
　　 結(jié)論：
　　 1、TOLF黃韌帶中彈力纖維結(jié)構(gòu)紊亂、數(shù)量減少，膠原纖維增加是導(dǎo)致黃韌帶骨化的主要原因;證實(shí)Ⅵ