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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)三大惡性腫瘤之一,雖然發(fā)病率僅占第三位,但其死亡率位居?jì)D科惡性腫瘤之首,5年生存率約為30%,且病死率有逐年增加的趨勢(shì)。卵巢癌由于發(fā)現(xiàn)較晚,手術(shù)時(shí)機(jī)多已失去,普通的化療、放療由于化療藥物耐藥及放療抵抗等原因,療效有限。本實(shí)驗(yàn)通過免疫靶向治療的方法,探索Her-2高表達(dá)類型卵巢癌的新治療方法。觀察131I標(biāo)記的曲妥珠單抗(trastuzumab,商品名herceptin)對(duì)Her-2高表達(dá)的卵巢癌細(xì)胞skov-3
2、的化療增敏作用。
方法:應(yīng)用Iodogen法將131I標(biāo)記到herceptin上,并測(cè)定放化學(xué)純度、放射性濃度、免疫結(jié)合率、Herceptin標(biāo)記率、放射性比活度進(jìn)行質(zhì)量控制,制備131I-herceptin。實(shí)驗(yàn)設(shè)空白組、131I-herceptin組、順鉑(DDP)組、131I-herceptin和順鉑(DDP)聯(lián)合組。MTT‘法測(cè)定不同濃度順鉑(DDP)和131I-herceptin以及順鉑(DDP)和131I-he
3、rceptin聯(lián)合對(duì)skov-3的生長(zhǎng)抑制率,并畫出生長(zhǎng)抑制率曲線。流式細(xì)胞儀分別測(cè)四組不同處理的凋亡率。采用免疫組化法分別檢測(cè)未處理的skov-3和131I-herceptin作用48小時(shí)后的skov一3的Her2和survivin表達(dá)情況,并比較作用前后的表達(dá)率。
結(jié)果:MTT法測(cè)得順鉑(DDP)生長(zhǎng)抑制率并根據(jù)生長(zhǎng)抑制率曲線得出4.685μg時(shí)為80%、3.760μg時(shí)為70%、2.75μg時(shí)為60%、2.320μg
4、時(shí)為50%、2.020μg時(shí)為40%、1.560μg時(shí)為30%、1.130μg時(shí)為20%。MTT法測(cè)得131I-Herceptin生長(zhǎng)抑制率,根據(jù)生長(zhǎng)抑制率曲線得出生長(zhǎng)抑制率為10%時(shí)131I-Herceptin的濃度為0.75×105Bq/ml。MTT法測(cè)得各濃度聯(lián)合組的生長(zhǎng)抑制率明顯高于相加組,P<0.05。應(yīng)用金氏公式計(jì)算各組DDP與131I-Herceptin相互作用q值,得出q值均大于1。根據(jù)CDI(兩藥相互作用指數(shù))計(jì)算得出
5、各聯(lián)合組CDI(兩藥相互作用指數(shù))均小于1。流式細(xì)胞儀測(cè)得skov-3細(xì)胞的凋亡率隨藥物濃度的降低而減小。各濃度聯(lián)合組的凋亡率要明顯高于單藥順鉑(DDP)組和131I-Iterceptin組,P<0.05。并且各濃度聯(lián)合組的凋亡率明顯高于相加組,P<0.05。131I-Herceptin組處理后Her-2標(biāo)記指數(shù)由36%降至21%,survivin基因標(biāo)記指數(shù)由21%降至12%。
結(jié)論:1.131I-herceptin對(duì)卵
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