HNF4α在肝細(xì)胞肝癌中調(diào)控Wnt信號通路誘發(fā)的上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化過程的分子機(jī)制.pdf

1、肝癌是世界上第五大常見的惡性腫瘤，其病死率排行第三位。其高致死率很大部分原因是由于肝癌細(xì)胞的高轉(zhuǎn)移性，發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞能在其他部位形成轉(zhuǎn)移瘤，且轉(zhuǎn)移瘤復(fù)發(fā)迅速，以致手術(shù)治療也無法完全切除體內(nèi)的腫瘤并最終導(dǎo)致死亡。有大量研究表明，EMT在腫瘤細(xì)胞浸潤及侵襲轉(zhuǎn)移過程中扮演了重要的角色。而肝細(xì)胞核因子4α(HNF4α)在維持肝細(xì)胞上皮表型中發(fā)揮了重要調(diào)節(jié)作用，正常細(xì)胞發(fā)生的EMT進(jìn)程伴隨著HNF4α的下調(diào);另有文獻(xiàn)報道，在正常細(xì)胞及肝癌

2、細(xì)胞中過表達(dá)HNF4α?xí)孓D(zhuǎn)其EMT進(jìn)程。而我們實(shí)驗室的另一組實(shí)驗也證明，在多種腫瘤細(xì)胞的EMT進(jìn)程中都發(fā)揮了調(diào)控作用的Wnt信號通路也參與調(diào)控了肝癌細(xì)胞的EMT進(jìn)程。因此，我們猜測HNF4α可能是通過抑制Wnt信號通路的活性來逆轉(zhuǎn)EMT進(jìn)程的。
　　 在本篇論文中，我們通過LUC，realtimePCR，westernblot，CoIP，ChIP,免疫熒光和免疫組化等實(shí)驗技術(shù)和研究手段，首次提出在肝癌細(xì)胞中HNF4α能夠抑制W

3、nt信號通路活性，并逆轉(zhuǎn)由Wnt信號通路誘發(fā)的EMT進(jìn)程。我們的實(shí)驗證明，HNF4α的這種抑制作用是通過其與β-catenin競爭性結(jié)合TCF4，從而干擾β-catenin對Wnt信號通路靶基因的轉(zhuǎn)錄激活功能而實(shí)現(xiàn)的;而HNF4α還能夠募集轉(zhuǎn)錄抑制因子以進(jìn)一步抑制這些靶基因的轉(zhuǎn)錄。由于在肝癌細(xì)胞中，Wnt信號通路是通過轉(zhuǎn)錄激活EMT相關(guān)調(diào)控因子，如Slug，Axin2等來誘發(fā)EMT過程的，因此，HNF4α對Wnt信號通路靶基因的轉(zhuǎn)錄抑制