柚皮苷通過(guò)調(diào)控p38MAPK信號(hào)通路保護(hù)H9c2心肌細(xì)胞對(duì)抗阿霉素誘導(dǎo)的損傷.pdf

1、目的：觀察p38MAPK信號(hào)通路在阿霉素(doxorubicin，DOX)誘導(dǎo)的H9c2心肌細(xì)胞損傷中的作用，探討柚皮苷(naringinx，NRG)是否通過(guò)抑制p38MAPK通路對(duì)抗阿霉素心肌細(xì)胞炎癥反應(yīng)及細(xì)胞毒性。
　　 方法：應(yīng)用5μmol·L-1 DOX處理H9c2心肌細(xì)胞建立DOX心肌細(xì)胞損傷模型;細(xì)胞主要分組為:正常對(duì)照組(Control)，阿霉素組(DOX)，柚皮苷預(yù)處理組(NRG+DOX)，N-乙酰半胱氨酸預(yù)處理

2、組(NAC+DOX)，SB203580預(yù)處理組(SB203580+DOX)，柚皮苷組(NRG)，N-乙酰半胱氨酸組(NAC)，SB203580組(SB203580); CCK-8比色法檢測(cè)細(xì)胞存活率;Western blot法測(cè)定p38MAPK、caspase-3蛋白表達(dá)水平;ILISA試劑盒檢測(cè)腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）和白細(xì)胞介素-6（IL-6）水平;Hochest33258核染色法觀察細(xì)胞凋亡的

3、形態(tài)學(xué)改變;雙氯熒光素(DCFH-DA)染色熒光顯微鏡照像檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的活性氧(ROS);羅丹明123(RH123)染色熒光顯微鏡照像檢測(cè)線粒體膜電位(MMP)。
　　 結(jié)果：5μmol·L-1 DOX處理24h可誘導(dǎo)H9c2心肌細(xì)胞損傷，表現(xiàn)為細(xì)胞存活率下降，凋亡細(xì)胞增加，TNF-α、IL-1β和IL-6水平明顯升高，活性氧(ROS)生成增多，線粒體膜電位(MMP)丟失;5μmol·L-1 DOX處理可時(shí)間依賴性上調(diào)H9c2心肌

4、細(xì)胞內(nèi)p-p38MAPK、cleaved caspase-3表達(dá);在5μmol·L-1 DOX處理H9c2心肌細(xì)胞前，應(yīng)用1μmol·L-1 NRG預(yù)處理150 min或1000μmol·L-1 NAC預(yù)處理60 min均能明顯抑制p-p38MAPK表達(dá);1μmol·L-1 NRG預(yù)處理150 min或3μmol·L-1 SB203580預(yù)處理60 min均能抑制DOX對(duì)H9c2心肌細(xì)胞損傷，使細(xì)胞存活率增加，凋亡細(xì)胞減少，TNF-α、