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1、目的:探討宮頸癌細胞中抑癌基因--肺癌腫瘤抑制物(tumor suppressor in lung cancer-1,TSLC1)基因CpG島甲基化狀態(tài)與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性及其臨床意義。 方法:(1)DNA提取采用TE9 DNA提取液及苯酚-氯仿抽提法提取慢性宮頸炎、宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)、宮頸鱗癌及腺癌組織DNA。(2)亞硫酸氫鈉修飾用EZ-DNA甲
2、基化試劑盒對基因組DNA進行亞硫酸氫鹽修飾和純化:將非甲基化的胞嘧啶轉(zhuǎn)變?yōu)槟蜞奏ぃ谆陌奏け3植蛔儭?3)甲基化特異性PCR(Methylation-Specific PCR.MSP)針對DNA亞硫酸氫鈉修飾后的改變設(shè)計兩套引物分別擴增以區(qū)分甲基化和非甲基化。(4)統(tǒng)計學(xué)分析用SPSS10.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析,基因啟動子甲基化與宮頸癌患者臨床病理的關(guān)聯(lián)分析用卡方檢驗,P<0.05顯示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果:宮頸癌中T
3、SLC1基因CpG島甲基化率66.2%(45/68)明顯高于宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)43.3%(29/67)及慢性宮頸炎6.7%(2/29),三者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);TSLC1基因CpG島甲基化在臨床Ⅰ期(48.4%)低于Ⅱ期(76.996)和Ⅲ期(90.9%),三者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。但宮頸鱗癌與腺癌TSLC1基因CpG島甲基化率
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