丁苯酞對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷后Smac蛋白表達(dá)影響的研究及意義.pdf

1、目的：采用不同方法觀察大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷后不同時(shí)間點(diǎn)促凋亡蛋白Smac(Second mitochondrial activator of caspase)的動(dòng)態(tài)表達(dá)變化及神經(jīng)元凋亡病理形態(tài)學(xué)結(jié)果，并研究丁苯酞對(duì)其的影響。
　　 方法：⑴采用改良的線栓法制作大鼠右側(cè)大腦中動(dòng)脈阻斷(middle cerebral arteryocculusion，MCAO)局灶性腦缺血再灌注模型。⑵180只雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為假手

2、術(shù)組(n=36)，模型組(n=36)，丁苯酞治療組(n=36)，丁苯酞預(yù)防組(n=36)，丁苯酞預(yù)防治療組(n=36)，每組再分為缺血再灌注6h，12h，24h三個(gè)亞組。丁苯酞給藥方式：丁苯酞膠囊用tween80溶液稀釋?zhuān)o藥劑量為80mg/kg，治療組于缺血1h后再灌注時(shí)即刻予以腹腔注射丁苯酞稀釋液；預(yù)防組采用手術(shù)前一周連續(xù)灌胃給藥，每日一次，手術(shù)當(dāng)天不給藥；預(yù)防治療組采用術(shù)前一周連續(xù)灌胃給藥，缺血1h后再灌注時(shí)即刻予以腹腔注射給藥一

3、次；假手術(shù)組與模型組于缺血1h后腹腔注射同體積生理鹽水。⑶HE染色觀察形態(tài)學(xué)變化，免疫組化法、Western免疫印跡檢測(cè)腦組織細(xì)胞Smac蛋白變化，TUNEL法原位檢測(cè)凋亡細(xì)胞。
　　 結(jié)果：①HE染色提示丁苯酞治療組與預(yù)防治療組在再灌注各時(shí)間點(diǎn)的缺血灶與模型組比較均減少，呈散點(diǎn)狀分布而且神經(jīng)元損傷明顯減輕。②免疫組化結(jié)果顯示：與假手術(shù)組比較Smac蛋白表達(dá)在模型組中明顯增多，于缺血再灌注6h即開(kāi)始出現(xiàn)并隨著時(shí)間的延長(zhǎng)其表達(dá)逐漸

4、增多，于24h可達(dá)高峰；治療組與預(yù)防治療組中Smac蛋白表達(dá)明顯減少，與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。③westernblot結(jié)果顯示：缺血再灌注24h后Smac蛋白表達(dá)水平由高到低依次為：模型組，丁苯酞預(yù)防組，治療組，預(yù)防治療組，假手術(shù)組，其中，模型組，治療組與預(yù)防治療組兩兩比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。④TUNEL染色顯示：相應(yīng)各時(shí)間點(diǎn)比較，模型組大鼠可見(jiàn)大量凋亡細(xì)胞，丁苯酞治療組與預(yù)防治療組中的凋亡細(xì)胞比模型組明顯減