胰腺癌相關(guān)SELDI-TOF-MS血清蛋白譜型的研究.pdf

1、胰腺癌相關(guān)SELDI-TOF-MS血清蛋白譜型的研究胰腺癌惡性程度極高，發(fā)病隱匿，進(jìn)展快，預(yù)后差，臨床迫切需要尋找有效的診斷標(biāo)志物。表面增強(qiáng)激光解吸，離子化-飛行時(shí)間-質(zhì)譜(SELDI-TOF-MS)是蛋白質(zhì)組學(xué)研究的技術(shù)策略之一，具有簡(jiǎn)便快捷、通量高、敏感性高等特點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于臨床蛋白質(zhì)組學(xué)研究，在腫瘤標(biāo)志物篩選研究中取得了較大進(jìn)展。本研究目的旨在運(yùn)用SELDI-TOF-MS技術(shù)分析胰腺癌患者與健康對(duì)照血清小分子蛋白/肽差異表達(dá)譜，

2、建立輔助胰腺癌診斷的特征模型并評(píng)價(jià)其與血清CA19-9水平聯(lián)合應(yīng)用的效果。 本文運(yùn)用SELDI-TOF-MS技術(shù)選用CM10蛋白芯片分析132例胰腺癌和81例健康對(duì)照血清的小分子蛋白質(zhì)/肽差異表達(dá)譜。將樣本分為訓(xùn)練集(建模樣本)和測(cè)試集(盲篩樣本)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。首先，選取30例胰腺癌血清和39例對(duì)照血清組成訓(xùn)練集，用支持向量機(jī)(SVM)分析兩組蛋白質(zhì)，肽差異表達(dá)譜，建立診斷模型。以診斷模型盲篩測(cè)試集，即用未參與建模的102例胰腺

3、癌和42例健康對(duì)照血清驗(yàn)證診斷模型的效力，并將判斷結(jié)果與胰腺癌臨床常規(guī)血清標(biāo)志物CA19-9值對(duì)比，探討聯(lián)合診斷的可能性。主要結(jié)果如下： 1.獲得樣本差異表達(dá)蛋白/肽譜峰：用ProteinChip Software 3.2.0軟件收集質(zhì)譜信號(hào)，在分子量2000～20000Da(低強(qiáng)度)范圍內(nèi)采用CM10芯片共檢測(cè)到200個(gè)蛋白質(zhì)差異峰，其中128個(gè)蛋白/肽在胰腺癌與健康對(duì)照血清中的表達(dá)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

4、 2.建立胰腺癌小分子差異蛋白診斷模型訓(xùn)練集：以30例胰腺癌和39例健康對(duì)照血清差異表達(dá)蛋白峰作為訓(xùn)練集，用支持向量機(jī)統(tǒng)計(jì)分析方法建立訓(xùn)練模型，模型由分子量在5300～8600Da間的4個(gè)差異峰構(gòu)成(peak1、peak2、peak3和peak4)，其特異度為100％(39/39)，敏感度為96.67％(29/30)。 3.驗(yàn)證胰腺癌差異蛋白診斷模型：進(jìn)一步用診斷模型訓(xùn)練集區(qū)分(診斷)102例未參與建模的胰腺癌和42例健康對(duì)照血

5、清樣本。該模型對(duì)胰腺癌的盲篩靈敏度為93.14％(95/102)，對(duì)健康血清樣本盲篩特異度為85.71％(36/42)。對(duì)全部132例胰腺癌及81例健康對(duì)照的診斷靈敏度為93.94％(124/132)，特異度為92.59％(75/81)。其中，對(duì)Ⅰa期胰腺癌(早期胰腺癌)診斷靈敏度為100％(11/11)。與現(xiàn)有血清標(biāo)志CA19-9比較和聯(lián)合應(yīng)用：以CA19-9>37U/ml作為可疑胰腺癌判斷值，132例胰腺癌中CA19-9檢測(cè)敏感度為

6、78.79％(104/132)。血清CA19-9聯(lián)合小分子差異蛋白診斷模型，診斷胰腺癌敏感度為97.73％(129/132)，判斷胰腺癌的準(zhǔn)確性明顯優(yōu)于單獨(dú)使用血清CA19-9。 文中的初步結(jié)果表明：運(yùn)用SELDI-TOF-MS技術(shù)分析胰腺癌與正常血清在CM10芯片上的差異蛋白表達(dá)譜，以SVM統(tǒng)計(jì)分析方法建立胰腺癌小分子差異蛋白診斷模型。該模型由4個(gè)差異峰組成，對(duì)胰腺癌有較高的診斷準(zhǔn)確度，并顯示對(duì)早期胰腺癌的分辨能力，與現(xiàn)有血清