RNAi封閉內(nèi)源性c-Myc對鼻咽癌細胞5-8F生物學(xué)特性及分子機制影響的初步研究.pdf

1、中南大學(xué)碩士學(xué)位論文RNAi封閉內(nèi)源性cMyc對鼻咽癌細胞58F生物學(xué)特性及分子機制影響的初步研究姓名：牛朝霞申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：李桂源20070501中文摘要Control細胞系。通過RTPCR齊[IWestemblot鑒定Cmyc基因的封閉效果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)與對照組相比，I能有效抑制cmyc的高表達，效果達70％75％；II的效果不明顯。因此我們選擇抑制效果最佳的5—8F／siRNAc—mycI／c3口D

2、性單克隆細胞系進行后續(xù)實驗?！疽种芻—myc基因高表達對58F細胞超微結(jié)構(gòu)的改變】將58F、58F／siRNAControl和58F／siRNAc—mycI／C3進行透射電鏡掃描，結(jié)果顯示：抑制cmyc表達的5—8F細胞表面微絨毛逐漸脫落，稀少；部分細胞結(jié)構(gòu)趨于正?；?，胞漿內(nèi)線粒體數(shù)量中等，結(jié)構(gòu)較清晰，少量內(nèi)質(zhì)網(wǎng)；部分細胞趨于靜止?fàn)顟B(tài)，胞漿內(nèi)線粒體嵴丟失或呈空泡變，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)輕度擴張?？瞻讓φ占拔刺幚?—8F細胞表面微絨毛較豐富，胞漿內(nèi)線粒

3、體數(shù)量較多，結(jié)構(gòu)較清晰，核漿比例嚴(yán)重失調(diào)。表明封閉cmyc的高表達有利于細胞間的緊密接觸，增強接觸抑制，不利于細胞的快速生長，從而逆轉(zhuǎn)5—8F細胞的惡性生物學(xué)行為?！疽种芻myc高表達對58F細胞生長的影響】將5—8F、58F／siRNAControl和58F／siRNAcmycI／C3細胞分別接種200個到平板中，靜止培養(yǎng)14天左右直至肉眼可見克隆形成，終止培養(yǎng)，觀察每組細胞的克隆形成數(shù)并計算克隆形成率；分別取o5104個細胞接種于9