奈達(dá)鉑聯(lián)合放射治療對人鼻咽癌5-8F細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　通過體外實(shí)驗(yàn)研究奈達(dá)鉑單獨(dú)或聯(lián)合X-射線對人鼻咽癌5-8F細(xì)胞的細(xì)胞增殖動力學(xué)影響以及作用機(jī)制，初步探討奈達(dá)鉑作為放射增敏藥物的可能性，為臨床上鼻咽癌放射增敏治療提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　方法:
　　本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用MTT法檢測奈達(dá)鉑對人鼻咽癌5-8F細(xì)胞的細(xì)胞增殖動力學(xué)影響，并求得IC10為后續(xù)試驗(yàn)提供適合藥物濃度:利用細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)首先得到低劑量奈達(dá)鉑對人鼻咽癌5-8F細(xì)胞的最佳照射時間(T)，進(jìn)而根據(jù)合適藥物濃

2、度和最佳照射時間再次進(jìn)行細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)，并根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)繪制細(xì)胞生存曲線，求得放射敏感性相關(guān)參數(shù)，觀察奈達(dá)鉑的放射敏感性;應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)觀察低劑量奈達(dá)鉑單獨(dú)或聯(lián)合X-射線對人鼻咽癌5-8F細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡的影響，運(yùn)用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測低劑量奈達(dá)鉑單獨(dú)或聯(lián)合X-射線對人鼻咽癌5-8F細(xì)胞凋亡蛋白Fas表達(dá)的影響，以探討其作用機(jī)制。
　　結(jié)果:
　　1.MTT法結(jié)果顯示:分別用不同濃度奈達(dá)鉑（1、2、4、8、16、32μg/m

3、l）作用人鼻咽癌5-8F細(xì)胞24h后，細(xì)胞增殖被不同程度的抑制，增值抑制率分別為11.40％、30.63％、38.01％、65.68％、73.43％、81.92％，隨藥物濃度增加及藥物作用時間延長，奈達(dá)鉑對人鼻咽癌5-8F細(xì)胞增殖抑制作用增強(qiáng)。根據(jù)細(xì)胞增殖抑制率，應(yīng)用SPSS17.0軟件求得奈達(dá)鉑對人鼻咽癌5-8F細(xì)胞的IC50為5.640μg/ml,IC10為1.128μg/ml。
　　2.細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:最佳照射時間

4、T為24小時，根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用Sigmaplot12.0軟件繪制細(xì)胞生存曲線，求得放射敏感性相關(guān)參數(shù)(D0、Dq、N):單純放療組的參數(shù)分別為:1.453Gy、1.216Gy、2.289;1μg/ml奈達(dá)鉑+放療組分別為:D0值為0.947Gy、 Dq值為0.701Gy、N值為2.087，根據(jù)公式計算放射增敏比(SER)，1μg/ml奈達(dá)鉑+放療組放射增敏比(SER) SERD0、SERDq、 SERSF2分別為1.537、1.690、

5、2.068。
　　3.流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示:(1)X-射線(0Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy)單純或聯(lián)合奈達(dá)鉑作用鼻咽癌5-8F細(xì)胞后，其細(xì)胞凋亡情況改變應(yīng)用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計分析，奈達(dá)鉑+放療組細(xì)胞凋亡率較單純放療組顯著升高(P＜0.05)。(2)X-射線(0Gy、2Gy、4Gy、6Gy)單純或聯(lián)合奈達(dá)鉑作用鼻咽癌5-8F細(xì)胞后，其細(xì)胞周期G2/M期分布改變應(yīng)用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計分析，奈達(dá)鉑+放療組細(xì)胞凋亡率

6、較單純放療組顯著升高(P＜0.05)。
　　4.細(xì)胞免疫化學(xué)染色結(jié)果顯示:X-射線(0Gy、2Gy、4Gy、6Gy)單純或聯(lián)合奈達(dá)鉑作用鼻咽癌5-8F細(xì)胞后，其細(xì)胞Fas蛋白表達(dá)情況應(yīng)用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計分析，奈達(dá)鉑+放療組細(xì)胞Fas蛋白陽性表達(dá)率較單純放療組顯著上調(diào)(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.低劑量奈達(dá)鉑可提高人鼻咽癌5-8F細(xì)胞的放射敏感性，其機(jī)制可能與低劑量奈達(dá)鉑可上調(diào)細(xì)胞內(nèi)的Fas蛋白表達(dá)，從