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文檔簡介
1、目的: 研究發(fā)育期的軸突導向分子Ephrin-A5在成年大鼠缺血性腦梗死皮層內的分布、梗塞灶周圍不同時點表達的變化及電針刺激干預對其表達變化的影響,探討電針刺激治療能否通過調控神經生長抑制因子Eptlrin-A5的表達這一途徑對缺血性腦梗死后的神經功能康復起到一定作用。 方法: 將90只SD大鼠隨機分為假手術組、模型組、刺激組,每組30只。將模型組、刺激組的SD大鼠右側大腦中動脈皮層支閉塞建立缺血性腦梗死(mid
2、dle cerebralartery occlusion,MCAO)模型,假手術組不凝閉大腦中動脈。刺激組的30只SD大鼠于術后次日起于內關、外關、足三里、三陰交穴給予電針刺激治療,采用疏密波刺激(疏波30Hz,密波100Hz),強度6~12V,以肢體相應部位出現(xiàn)輕微顫動為準。每天1次,每次30分鐘,連續(xù)治療6天,第7天暫停。采用免疫組化技術檢測Ephrin-A5的分布及細胞定位,在MCAO術后1、2、4周檢測梗塞灶周Ephrin-A5
3、表達的熒光灰度值,并結合熒光定量PCR技術檢測Ephrin-A5mRNA的表達量。 結果: 一.腦梗死后Ephrin-A5的分布 大鼠大腦皮層的V2MM(第二視皮質,內側內區(qū))、V2ML(第二視皮質,內側外區(qū))、V2L(第二視皮質,外側區(qū))、Aul(第一聽皮質)、AuV(第二聽皮質,腹側區(qū))及海馬區(qū)域Ephrin-A5表達較強,其主要分布在皮層的Ⅱ(外顆粒)層、Ⅲ(外錐體細胞)層、Ⅳ(內顆粒)層及Ⅴ(內錐體細胞)
4、層中的錐體細胞、顆粒細胞中。梗死灶側Ephrin-A5陽性信號較非梗死灶側強。 二.各組大鼠Ephrin-A5的表達 術后第1、2、4周刺激組的熒光灰度值分別為170.85±47.11、99.64±18.03、51.27±12.79;模型組為87.36±30.24、76.47±19.67、85.74±25.80;假手術組為27.69±12.44、22.93±21.36、24.48±18.61。刺激組1、2周表達均最高,4
5、周時低于模型組,差異具有統(tǒng)計學意義(p<0.05);模型組4周時表達最高,1、2周低于刺激組,但高于假手術組,差異具有統(tǒng)計學意義(p<0.05):模型組1周至4周表達無變化處于持續(xù)高水平,假手術組持續(xù)低水平表達,差異無統(tǒng)計學意義(p>0.05)。 三、各組大鼠Ephrin-A5 mRNA的表達 術后第1、2、4周刺激組的Ephrin-A5的相對值(Ephrin-A5的拷貝數(shù)/GAPDH的拷貝數(shù))分別為106.23±52.
6、82、45.52±15.10、10。59±1.93;模型組為19.36±4.24、20.62±5.41、17.23±4.39;假手術組為6.89±1.34、6.34±1.28、5.18±1.09。刺激組1、2周表達均最高,4周時低于模型組,差異具有統(tǒng)計學意義(p<0.05);模型組4周時表達最高,1、2周低于刺激組,但高于假手術組,差異具有統(tǒng)計學意義(p<0.05);模型組1周至4周表達無變化處于持續(xù)高水平,差異無統(tǒng)計學意義(p>0.0
7、5);假手術組各周持續(xù)低水平表達,差異無統(tǒng)計學意義(p>0.05)。 四、術后大鼠肢體功能評分 平衡木試驗<'[5]>評分結果:大腦中動脈閉塞術后第1周刺激組肢體功能較模型組差,評分差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);術后第2周刺激組肢體功能較模型組好,評分差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);術后第4周刺激組與模型組評分差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。刺激組及模型組術后2周評分較各組第1周評分差異有統(tǒng)計學差異(P<0.05
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