不同培養(yǎng)體系下小鼠4，8-細(xì)胞胚胎卵裂球發(fā)育質(zhì)量與能力的研究.pdf

1、卵裂球分離以及胚胎分割技術(shù)在農(nóng)業(yè)、生物學(xué)及醫(yī)學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域已得到廣泛應(yīng)用，但是其培養(yǎng)體系仍有待于進(jìn)一步完善。為了建立更為簡單而高效的卵裂球培養(yǎng)體系，提高其發(fā)育質(zhì)量和能力，本實驗比較了培養(yǎng)液中不同成分對昆明小鼠4，8-細(xì)胞胚胎單卵裂球體外發(fā)育的影響，并采用體細(xì)胞共培養(yǎng)對小鼠4，8-細(xì)胞胚胎單卵裂球體外培養(yǎng)體系進(jìn)行優(yōu)化，觀察了不同體細(xì)胞類型對小鼠4，8-細(xì)胞胚胎單卵裂球發(fā)育的影響。此外，還對中間受體培養(yǎng)體系在小鼠4，8-細(xì)胞胚胎單卵裂球發(fā)育上

2、的影響進(jìn)行了研究。 對昆明小鼠4，8-細(xì)胞胚胎單卵裂球體外培養(yǎng)的研究結(jié)果表明，CZB是一種簡單而有效的昆明小鼠卵裂球體外培養(yǎng)體系。在本實驗條件下，未發(fā)現(xiàn)?；撬釋?，8-細(xì)胞單個卵裂球的囊胚發(fā)育率和囊胚細(xì)胞數(shù)的促進(jìn)作用。這可能是由于本試驗使用的培養(yǎng)體系和小鼠品系不同造成的，同時也說明了并不是在所有實驗條件下添加牛磺酸都能提高小鼠胚胎的體外發(fā)育能力。而實驗中也發(fā)現(xiàn)，在有葡萄糖存在時，小鼠4，8-細(xì)胞胚胎單個卵裂球的囊胚發(fā)育率和囊胚細(xì)

3、胞數(shù)均有顯著的提高。單一培養(yǎng)體系中小鼠4，8-細(xì)胞胚胎單個卵裂球的囊胚發(fā)育率和囊胚細(xì)胞數(shù)分別達(dá)到38％、12.43和20％、8.48。為了改善小鼠4，8-細(xì)胞胚胎單卵裂球的體外發(fā)育環(huán)境，在實驗中將小鼠4，8-細(xì)胞胚胎單卵裂球與豬輸卵管上皮和顆粒細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)，并比較了共培養(yǎng)和單一培養(yǎng)體系中單卵裂球的囊胚發(fā)育率和囊胚細(xì)胞數(shù)的差異。結(jié)果表明，豬輸卵管上皮細(xì)胞共培養(yǎng)體系中小鼠卵裂球的囊胚發(fā)育率和囊胚細(xì)胞數(shù)明顯高于單一培養(yǎng)體系，其囊胚發(fā)育率和囊

4、胚細(xì)胞數(shù)分別達(dá)到47％、17.57和26％、11.43，表明豬輸卵管上皮細(xì)胞共培養(yǎng)體系可顯著促進(jìn)其體外發(fā)育的質(zhì)量和潛力。而豬顆粒細(xì)胞共培養(yǎng)體系沒有顯著促進(jìn)小鼠卵裂球的囊胚發(fā)育率和囊胚細(xì)胞數(shù)，同單一培養(yǎng)體系培養(yǎng)效果相比差異不顯著。 中間受體的實驗結(jié)果表明兔輸卵管能夠較好的促進(jìn)卵裂球的發(fā)育質(zhì)量，但是胚胎丟失嚴(yán)重，回收率低。而將小鼠卵裂球移入同種發(fā)情母鼠的子宮培養(yǎng)，其胚胎的回收率仍然很低。這些研究結(jié)果說明其主要原因可能是自然存在的體內(nèi)