NOD2基因過表達(dá)及沉默對(duì)舌鱗癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響.pdf

1、目的：舌鱗狀細(xì)胞癌是口腔頜面外科最常見的惡性腫瘤之一,本課題組前期關(guān)于NOD2、HBD-2的研究基礎(chǔ)示：在舌鱗癌細(xì)胞中NOD2與HBD-2表達(dá)均低于口腔正常黏膜。結(jié)合近年本領(lǐng)域研究進(jìn)展，我們提出：在舌鱗癌細(xì)胞，NOD2表達(dá)降低致HBD-2分泌減少； NOD2可能具有上調(diào)舌鱗癌自噬，增強(qiáng)抗菌的作用，促進(jìn)CD4+T細(xì)胞免疫；HBD-2促進(jìn)溶酶體降解是NOD2上調(diào)自噬的關(guān)鍵因素。本實(shí)驗(yàn)通過觀察NOD2過表達(dá)或沉默對(duì)舌鱗癌細(xì)胞Tca8113增殖

2、、凋亡的影響，以探討NOD2對(duì)舌鱗癌的影響。
　　方法：構(gòu)建NOD2表達(dá)載體（NOD2-pEZ-M29）和NOD2-shRNA（NOD2-pGPU6/GFP/Ne)表達(dá)載體，分別轉(zhuǎn)染舌鱗癌細(xì)胞48h后，RT-PCR和Western blot法檢測(cè)NOD2和HBD-2分子及蛋白表達(dá)，MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡比例。
　　結(jié)果：成功構(gòu)建NOD2表達(dá)載體和NOD2-shRNA表達(dá)載體；轉(zhuǎn)染NOD2表達(dá)載體的Tca

3、8113細(xì)胞NOD2和HBD-2表達(dá)較對(duì)照組顯著增高；轉(zhuǎn)染NOD2-shRNA載體的Tca8113細(xì)胞NOD2和HBD-2表達(dá)較對(duì)照組顯著降低。MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖，經(jīng)轉(zhuǎn)染NOD2表達(dá)載體的Tca8113細(xì)胞增殖速度較對(duì)照組慢，經(jīng)轉(zhuǎn)染NOD2-shRNA干擾載體的Tca8113細(xì)胞增殖較對(duì)照組快。流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡，經(jīng)轉(zhuǎn)染NOD2表達(dá)載體的Tca8113細(xì)胞凋亡率升高；轉(zhuǎn)染NOD2-shRNA干擾載體的Tca8113細(xì)胞凋亡率降低。