NOD2基因過表達及沉默對舌鱗癌細胞增殖和凋亡的影響.pdf

1、目的：舌鱗狀細胞癌是口腔頜面外科最常見的惡性腫瘤之一,本課題組前期關(guān)于NOD2、HBD-2的研究基礎(chǔ)示：在舌鱗癌細胞中NOD2與HBD-2表達均低于口腔正常黏膜。結(jié)合近年本領(lǐng)域研究進展，我們提出：在舌鱗癌細胞，NOD2表達降低致HBD-2分泌減少； NOD2可能具有上調(diào)舌鱗癌自噬，增強抗菌的作用，促進CD4+T細胞免疫；HBD-2促進溶酶體降解是NOD2上調(diào)自噬的關(guān)鍵因素。本實驗通過觀察NOD2過表達或沉默對舌鱗癌細胞Tca8113增殖

2、、凋亡的影響，以探討NOD2對舌鱗癌的影響。
　　方法：構(gòu)建NOD2表達載體（NOD2-pEZ-M29）和NOD2-shRNA（NOD2-pGPU6/GFP/Ne)表達載體，分別轉(zhuǎn)染舌鱗癌細胞48h后，RT-PCR和Western blot法檢測NOD2和HBD-2分子及蛋白表達，MTT法檢測細胞增殖，流式細胞儀檢測細胞凋亡比例。
　　結(jié)果：成功構(gòu)建NOD2表達載體和NOD2-shRNA表達載體；轉(zhuǎn)染NOD2表達載體的Tca

3、8113細胞NOD2和HBD-2表達較對照組顯著增高；轉(zhuǎn)染NOD2-shRNA載體的Tca8113細胞NOD2和HBD-2表達較對照組顯著降低。MTT法檢測細胞增殖，經(jīng)轉(zhuǎn)染NOD2表達載體的Tca8113細胞增殖速度較對照組慢，經(jīng)轉(zhuǎn)染NOD2-shRNA干擾載體的Tca8113細胞增殖較對照組快。流式細胞儀檢測細胞凋亡，經(jīng)轉(zhuǎn)染NOD2表達載體的Tca8113細胞凋亡率升高；轉(zhuǎn)染NOD2-shRNA干擾載體的Tca8113細胞凋亡率降低。