兩個(gè)腫瘤相關(guān)基因功能和作用機(jī)制的探索與研究.pdf

1、惡性腫瘤的形成是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，包括腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。這一過(guò)程受到一系列癌基因和抑癌基因的調(diào)控。對(duì)這些基因的功能研究可以幫助更好的理解腫瘤以及其它一些疾病的發(fā)生機(jī)理。本研究主要探討了病毒癌基因HPV16E7導(dǎo)致宮頸癌細(xì)胞免疫逃逸的機(jī)制和腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制基因MIM（missing in metastasis）在造血干細(xì)胞和祖細(xì)胞(haematopoietic stem and progenitor cells, HSPCs)骨髓移

2、植歸巢過(guò)程中的作用機(jī)制。
　　宮頸癌是導(dǎo)致婦女癌癥相關(guān)死亡的重要原因。高危型人乳頭瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)感染是目前公認(rèn)的宮頸癌發(fā)生的決定性危險(xiǎn)因素。腫瘤的免疫逃逸是宮頸癌發(fā)生的重要機(jī)制之一，而腫瘤細(xì)胞表面MHC-I分子表達(dá)下調(diào)是腫瘤免疫逃逸的主要方式。前期研究發(fā)現(xiàn)HPVE7能抑制宮頸癌細(xì)胞MHC-I分子的表達(dá)，但具體的分子機(jī)制尚不清楚。
　　在本研究中，通過(guò)熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)和染色質(zhì)免疫

3、沉淀等技術(shù)發(fā)現(xiàn)HPV16E7與HLA-A2啟動(dòng)子上游的RXRβ的基序結(jié)合（GGTCA）并抑制HLA-A2的啟動(dòng)子活性。此外還發(fā)現(xiàn)HPV16E7尚能通過(guò)抑制NF-κB信號(hào)通路的活性來(lái)抑制腫瘤壞死因子TNF-α誘導(dǎo)的MHC-I分子的表達(dá)上調(diào)。
　　研究第一次闡明了HPV16E7通過(guò)兩種機(jī)制來(lái)分別抑制HLA-A2的基礎(chǔ)表達(dá)即通過(guò)直接與HLA-A2啟動(dòng)結(jié)合子和抑制誘導(dǎo)性表達(dá)即通過(guò)抑制NF-κB通路來(lái)影響宮頸癌的發(fā)生。這為闡明人乳頭瘤病毒在

4、宮頸癌發(fā)生過(guò)程中的作用提供了新的思路和方向。
　　HSPCs擁有自我更新和自我識(shí)別的能力，可以在致死輻射劑量處理的人以及動(dòng)物模型中起到重組造血網(wǎng)絡(luò)的作用。因此，被廣泛用于重構(gòu)惡性血液疾病和特定的非惡性疾病放療后的淋巴造血作用。HSPCs的植入和造血細(xì)胞的重構(gòu)是否成功，取決于干細(xì)胞向宿主的骨髓腔歸巢的過(guò)程，以及移植后干細(xì)胞是否可以保留在合適的骨髓微環(huán)境中，從而使得植入的干細(xì)胞可以和一個(gè)或者多個(gè)特定的微環(huán)境中的宿主細(xì)胞如間質(zhì)細(xì)胞、上皮

5、細(xì)胞、表達(dá)SDF的網(wǎng)狀細(xì)胞、表達(dá)nestin的間質(zhì)干細(xì)胞中相互作用。
　　在本研究中，應(yīng)用基因捕獲技術(shù)和基因型分析，建立了MIM敲除型小鼠品系。并在隨后進(jìn)行的小鼠骨髓細(xì)胞移植實(shí)驗(yàn)中，利用流式細(xì)胞術(shù)觀測(cè)移植的小鼠骨髓細(xì)胞在受體小鼠中的分部情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在短期追蹤的實(shí)驗(yàn)組中，MIM敲除型小鼠的骨髓細(xì)胞具有在受體小鼠體內(nèi)更強(qiáng)的歸巢能力。證明了MIM可能作為臨床上改進(jìn)骨髓移植手術(shù)的靶蛋白。同時(shí)也設(shè)計(jì)兩個(gè)可以抑制MIM蛋白二聚化的短肽。進(jìn)