兩個腫瘤相關(guān)基因功能和作用機制的探索與研究.pdf

1、惡性腫瘤的形成是一個復雜的過程，包括腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵潤和轉(zhuǎn)移。這一過程受到一系列癌基因和抑癌基因的調(diào)控。對這些基因的功能研究可以幫助更好的理解腫瘤以及其它一些疾病的發(fā)生機理。本研究主要探討了病毒癌基因HPV16E7導致宮頸癌細胞免疫逃逸的機制和腫瘤轉(zhuǎn)移機制基因MIM（missing in metastasis）在造血干細胞和祖細胞(haematopoietic stem and progenitor cells, HSPCs)骨髓移

2、植歸巢過程中的作用機制。
　　宮頸癌是導致婦女癌癥相關(guān)死亡的重要原因。高危型人乳頭瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)感染是目前公認的宮頸癌發(fā)生的決定性危險因素。腫瘤的免疫逃逸是宮頸癌發(fā)生的重要機制之一，而腫瘤細胞表面MHC-I分子表達下調(diào)是腫瘤免疫逃逸的主要方式。前期研究發(fā)現(xiàn)HPVE7能抑制宮頸癌細胞MHC-I分子的表達，但具體的分子機制尚不清楚。
　　在本研究中，通過熒光素酶報告基因檢測和染色質(zhì)免疫

3、沉淀等技術(shù)發(fā)現(xiàn)HPV16E7與HLA-A2啟動子上游的RXRβ的基序結(jié)合（GGTCA）并抑制HLA-A2的啟動子活性。此外還發(fā)現(xiàn)HPV16E7尚能通過抑制NF-κB信號通路的活性來抑制腫瘤壞死因子TNF-α誘導的MHC-I分子的表達上調(diào)。
　　研究第一次闡明了HPV16E7通過兩種機制來分別抑制HLA-A2的基礎(chǔ)表達即通過直接與HLA-A2啟動結(jié)合子和抑制誘導性表達即通過抑制NF-κB通路來影響宮頸癌的發(fā)生。這為闡明人乳頭瘤病毒在

4、宮頸癌發(fā)生過程中的作用提供了新的思路和方向。
　　HSPCs擁有自我更新和自我識別的能力，可以在致死輻射劑量處理的人以及動物模型中起到重組造血網(wǎng)絡(luò)的作用。因此，被廣泛用于重構(gòu)惡性血液疾病和特定的非惡性疾病放療后的淋巴造血作用。HSPCs的植入和造血細胞的重構(gòu)是否成功，取決于干細胞向宿主的骨髓腔歸巢的過程，以及移植后干細胞是否可以保留在合適的骨髓微環(huán)境中，從而使得植入的干細胞可以和一個或者多個特定的微環(huán)境中的宿主細胞如間質(zhì)細胞、上皮

5、細胞、表達SDF的網(wǎng)狀細胞、表達nestin的間質(zhì)干細胞中相互作用。
　　在本研究中，應用基因捕獲技術(shù)和基因型分析，建立了MIM敲除型小鼠品系。并在隨后進行的小鼠骨髓細胞移植實驗中，利用流式細胞術(shù)觀測移植的小鼠骨髓細胞在受體小鼠中的分部情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在短期追蹤的實驗組中，MIM敲除型小鼠的骨髓細胞具有在受體小鼠體內(nèi)更強的歸巢能力。證明了MIM可能作為臨床上改進骨髓移植手術(shù)的靶蛋白。同時也設(shè)計兩個可以抑制MIM蛋白二聚化的短肽。進