P311及其相互作用蛋白對肺泡發(fā)育的影響初探.pdf

1、肺泡是肺組織進(jìn)行氣體交換的基本功能單位，其發(fā)育質(zhì)量直接影響著機(jī)體對氧的獲取，了解其發(fā)生發(fā)育及調(diào)節(jié)機(jī)制將有望為一些肺泡發(fā)育不良或損傷性疾病的治療提供方向。哺乳動物肺泡發(fā)育主要發(fā)生在胚胎發(fā)育后期和初生期，P311是我們利用抑制性差減雜交技術(shù)克隆的在肺泡發(fā)生相關(guān)階段特異表達(dá)的基因。為了進(jìn)一步明確其在肺泡發(fā)育中的功能，實(shí)驗(yàn)室前期利用酵母雙雜交系統(tǒng)，從小鼠肺組織中篩選出了七個P311結(jié)合蛋白，其中Loxl-1、SPARC、Gal-1的已知功能與(

2、肺)組織發(fā)育相關(guān)。在此基礎(chǔ)上，本文首先利用雙重免疫組織化學(xué)染色技術(shù)檢測了P311在小鼠肺組織內(nèi)表達(dá)的細(xì)胞定位及與其結(jié)合蛋白的共定位情況，發(fā)現(xiàn)P311主要表達(dá)于肌成纖維細(xì)胞及Ⅰ型和Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞中；Loxl-1、SPARC、Gal-1與P311在小鼠肺組織中均存在共定位，特別是Gal-1與P311廣泛共定位于隔壁頂端或次級隔壁潛在發(fā)生處，提示它們可能在次級隔壁的發(fā)生和生長中起作用。由于肺泡的發(fā)生出現(xiàn)在肺組織形成的特定時期，我們隨后分別檢

3、測了P311和Gal-1在肺組織中的表達(dá)時序性，發(fā)現(xiàn)二者在mRNA和蛋白水平的表達(dá)時序性都極其相似，均在小鼠肺組織發(fā)育的原始肺泡期(胚胎期18.5天，E18.5)表達(dá)開始上調(diào)，到肺泡期(出生后11天，P11)達(dá)到高峰，之后開始下降，至成熟期(出生后30天，P30)表達(dá)量大大降低。進(jìn)一步研究顯示，過表達(dá)P311和Gal-1均可促進(jìn)A549細(xì)胞遷移；P311可促進(jìn)A549細(xì)胞從G1期向S期轉(zhuǎn)化，Gal-1基本不影響細(xì)胞增殖，但Gal-1對P