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文檔簡介
1、目的:通過PCR方法研究乳腺癌轉移抑制因子1(BRMS1)在人乳腺癌細胞系MDAMB-231和MCF-7中的表達受體。通過進行細胞功能試驗,研究乳腺癌轉移抑制因子1(BRMS1)對于人乳腺癌細胞MDAMB-231和MCF-7在遷移、侵襲等方面的生物學影響及作用機制。通過分析臨床、病理資料,研究乳腺癌轉移抑制因子1(BRMS1)的mRNA表達水平與乳腺癌患者預后之間的相關性。
方法:質粒(MDA231PEF,MCF-7PEF)通
2、過克隆到大腸桿菌中進行轉型,然后通過PCR實驗選擇正確的質粒結構并進行擴增。對MDAMB-231和MCF-7細胞系進行RNA提取并進行RNA定量,使用cDNA分析儀進行反轉錄。通過加入核酶的PCR實驗將BRMS1進行部分基因敲除,將基因部分敲除的BRMS1(MDAMB231brms1kd,MCF7brms1kd)通過大腸桿菌進行克隆,然后進行擴增、純化。通過PCR方法研究BRMS1在人乳腺癌細胞系MDAMB-231和MCF-7中的表達。
3、
在乳腺癌組織樣本中對乳腺癌轉移抑制因子1(BRMS1)的基因轉錄本進行量化,在人乳腺癌細胞系MDAMB-231和MCF-7中對乳腺癌轉移抑制因子(BRMS1)的表達進行基因修飾,并進一步檢測其生物學反應,同時對影響B(tài)RMS1的關鍵信號通道進行研究。
通過分析臨床、病理資料,對乳腺癌轉移抑制因子1(BRMS1)在人類乳腺癌中的轉錄表達水平進行了定量評估。
結果:乳腺癌轉移抑制因子1(BRMS1)被證實在人乳
4、腺癌細胞系MDAMB-231和MCF-7中均有明顯的表達。與各自的野生型及對照細胞比較,部分基因敲除后的乳腺癌轉移抑制因子在MDAMB-231和MCF-7細胞的生長、遷移、侵襲方面都有明顯的作用(p<0.05)。磷脂酶Cγ(PLCγ)對乳腺癌轉移抑制因子1(BRMS1)誘導的細胞遷移有明顯的影響。乳腺癌轉移抑制因子(BRMS1)的表達水平在高級別的腫瘤中(p=0.12)、存在遠處轉移的病人中(p=0.05)及死于乳腺癌的病人中(p=0.
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