神經(jīng)生長因子對大鼠腦缺血再灌注后TGF-β-,1-和IL-1β表達(dá)的影響.pdf

1、目的：本實驗利用大鼠中動脈缺血再灌注模型(MCAO)，以免疫組織化學(xué)方法觀察腦缺血2h再灌注不同時間點轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth factor-β1)和白介素-1β(Interleukin-1β)的表達(dá)，并觀察NGF對其表達(dá)的影響，探討神經(jīng)生長因子(nerve growth factor)的腦保護(hù)作用，為臨床應(yīng)用NGF治療腦梗死提供理論依據(jù)。 方法：健康成年SD大鼠55只(由大連醫(yī)科大學(xué)實驗動物中

2、心提供)，雌雄不限，體重200-250克，清潔級，飼養(yǎng)環(huán)境溫度21℃，自由進(jìn)食水。隨機分為假手術(shù)組5只(第1組)，對照組30只，按缺血2h再灌注2h、6h、12h、24h、48h、72h再分為6組(分別為第2、3、4、5、6、7組)，每組5只，NGF組10只(第8組)和生理鹽水對照組10只(第9組)。參照Nagasawa報告的方法，用10％的水合氯醛(0.35毫升/100毫克腹腔注射)麻醉動物，取仰臥位固定在手術(shù)臺上，行右側(cè)大腦中動脈閉

3、塞術(shù)，頸部正中切口，分離出右側(cè)頸總、頸外和頸內(nèi)動脈，結(jié)扎頸外動脈分支起始處，頸總動脈近心端，在頸總動脈分叉處剪一小口，把頭端蘸有肝素的直徑為0.2mm的高彈力魚線向頸內(nèi)動脈端插入，繼續(xù)向前推進(jìn)直到感覺有輕微阻力，即約18mm，提示已到大腦中動脈起始部。2h后緩慢拔出魚線即可實施再灌注。動物蘇醒后觀察其體態(tài)及行為，以判斷大腦中動脈閉塞模型成功與否。假手術(shù)組插入魚線后馬上抽出，余步驟同手術(shù)組。缺血再灌注模型動物清醒后，左側(cè)前肢屈曲內(nèi)收者為研