中國(guó)漢族人群中tPA Alu I-D基因多態(tài)性和BDNF基因單體型與散發(fā)性阿爾茨海默病的關(guān)聯(lián)性研究.pdf

1、目的：研究在中國(guó)漢族人群中一些散發(fā)性阿爾茨海默病(AD)的易感性基因多態(tài)性的分布,探討其與AD的關(guān)系,為更詳盡的了解AD潛在的發(fā)病機(jī)制提供分子流行病學(xué)依據(jù),并為AD的早期診斷和治療提供更多的分子生物學(xué)指標(biāo)。 方法：采用病例-對(duì)照研究的方法,應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng).限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)技術(shù)檢測(cè)106例散發(fā)性AD患者和110例健康對(duì)照者六個(gè)基因多態(tài)性位點(diǎn):ApoE、tPAAluI/D和BDNF 196G/A、270C/

2、T、11757G/C和712G/A的單核苷酸多態(tài)性(SNP)在中國(guó)漢族人群中的分布,并通過(guò)比值比(Odds Ratio, OR)作疾病關(guān)聯(lián)分析。采用SHEsis軟件對(duì)BDNF基因4個(gè)SNPs進(jìn)行連鎖不平衡和單體型分析。 結(jié)果： 1.ApoE基因多態(tài)性的檢測(cè)及其與AD的相關(guān)性分析:AD組與對(duì)照組ApoE各基因型分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=37.297, P=0.000),AD組攜帶ApoEε4等位基因者明顯高于健康對(duì)照組(

3、42.5％和19.1％; χ2=13.885, P=0.000),其OR值為3.126(95％CI=1.696～5.765);AD組攜帶ApoEε2等位基因者明顯低于健康對(duì)照組(7.5％和36.4％; χ2=25.935, P=0.000),其OR值為0.143(95％CI=0.063～0.324)。進(jìn)一步將樣本按性別分層后發(fā)現(xiàn),ApoEε4攜帶者在女性中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001)。另外,ApoEε4等位基因與發(fā)病年齡和疾病的嚴(yán)

4、重程度無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 2.tPA AluI/D基因多態(tài)性的檢測(cè)及其與AD的相關(guān)性分析:AD組與對(duì)照組基因型頻率(χ2=5.795,P=0.055)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,AD組tPA AluI等位基因頻率明顯高于健康對(duì)照組(59.4％和48.6％; χ2=5.066, P=0.024),其OR值為1.547(95％CI=1.057～2.264.)。進(jìn)一步將樣本按發(fā)病年齡和性別分層,未發(fā)現(xiàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)

5、,另外,各基因型與發(fā)病年齡和疾病的嚴(yán)重程度無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 3.BDNF 196G/A、270C/T、11757G/C和712G/A多態(tài)性的檢測(cè)及其與AD的相關(guān)性分析： (1)BDNF 196G/A多態(tài)性的檢測(cè)及其與AD的相關(guān)性分析:AD組和對(duì)照組基因型頻率(χ2=0.291, P=0.865)和等位基因頻率(χ2=0.000,P=0.994)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。進(jìn)一步將樣本按發(fā)病年齡和性別分層,也未發(fā)現(xiàn)差

6、異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。另外,各基因型與發(fā)病年齡和疾病的嚴(yán)重程度無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 (2)BDNF 270C/T多態(tài)性的檢測(cè)及其與AD的相關(guān)性分析:AD組和對(duì)照組基因型頻率分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.571, P=0.102)。AD組270T等位基因頻率顯著低于健康對(duì)照組(0.9％和4.5％; χ2=5.187, P=0.036),其OR值為0.200(95％CI=0.043～0.924)。 (

7、3)BDNF 11757G/C多態(tài)性的檢測(cè)及其與AD的相關(guān)性分析:AD組和對(duì)照組基因型頻率(χ2=0.286, P=0.867)和等位基因頻率(χ2=0.000, P=0.991)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。進(jìn)一步將樣本按發(fā)病年齡和性別分層,也未發(fā)現(xiàn)差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。另外,各基因型與發(fā)病年齡和疾病的嚴(yán)重程度無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 (4)BDNF 712G/A多態(tài)性的檢測(cè)及其與AD的相關(guān)性分析:AD組和對(duì)照組基因型

8、頻率(χ2=6.450, P=0.040)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。AD組712A等位基因頻率顯著低于健康對(duì)照組(0.5％和4.5％；χ2=7.220, P=0.011),其OR值為0.100 (95％CI=0.013～0.784)。 (5)BDNF單體型、雙體型分析及其與AD的相關(guān)性分析：與對(duì)照組相比,單體型270C-11757G在AD組顯著增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);AD組單體型196G-712A、270T-11757G

9、、11757G-712A、196G-270T-11757G、196G-11757G-712A、270T-11757G-712A和196G-270T-11757G-712A頻率顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。按ApoEε4分層后發(fā)現(xiàn),在非ApoEε4攜帶者中,與對(duì)照組相比,AD組單體型196G-11757G-712A頻率(χ2=4.787, P=0.029)顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,其OR值為0.961(95％(CI=0.9

10、33～0.990);而在ApoEε4攜帶者中差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在BDNF 196G/A、11757G/C和712G/A多態(tài)性之間組合的單體型基礎(chǔ)上進(jìn)行雙體型分析,與對(duì)照組相比,單體型196A-11757C-712G和單體型196G-11757G-712A組合的雙體型頻率在AD組顯著降低(χ2=5.947, P=0.029),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,其OR值為0.945(95％CI=0.904～0.989)。但這些保護(hù)或危險(xiǎn)效應(yīng)應(yīng)該被謹(jǐn)慎地看待

11、,因?yàn)樵谖覀兊臉颖局袛y帶270T和712A這兩個(gè)等位基因的個(gè)體數(shù)量少。4.ApoE、tPAAluI/D、BDNF 196G/A和BDNF 11757G/C之間交互作用的分析:AD組ApoEε4等位基因頻率顯著高于對(duì)照組(P>0.05),且與tPAAluI等位基因、BDNF 196G等位基因、BDNF 11757G等位基因之間存在交互作用,其OR值分別為4.988(95％CI=1.923～12.935)、2.674 (95％CI=1.13

12、3～6.312)和2.625(95％CI=1.109～6.216),P值分別為0.001、0.023和0.027。tPA AluI等位基因與BDNF 196G/A之間不存在交互作用,P>0.05。 結(jié)論： 1.ApoE基因：中國(guó)漢族人群中ApoE基因SNP與AD存在相關(guān)性,ApoEε4等位基因可能是AD的危險(xiǎn)因素,ApoEε2等位基因可能是AD的保護(hù)因素。 2.tPA AluI/D位點(diǎn)：中國(guó)漢族人群中tPA Al

13、uI/D位點(diǎn)SNP與AD存在相關(guān)性,AluI等位基因可能是AD的危險(xiǎn)因素。 3.BDNF基因：中國(guó)漢族人群中BDNF 196G/A位點(diǎn)SNP與AD無(wú)關(guān)聯(lián)；BDNF 270C/T位點(diǎn)SNP與AD存在相關(guān)性,T等位基因可能是AD的保護(hù)因素；BDNF 11757G/C位點(diǎn)SNP與AD無(wú)關(guān)聯(lián)；BDNF 712G/A位點(diǎn)SNP與AD存在相關(guān)性,A等位基因可能是AD的保護(hù)因素；單體型270C-712G可能是AD的危險(xiǎn)因素,而196G-712

14、A、270T-11757G、11757G-712A、 196G-270T-11757G、 196G-11757G-712A、 270T-11757G-712A和196G-270T-11757G-712A等單體型均可能是AD的保護(hù)因素；在非ApoEε4攜帶者中,BDNF196G/A、11757G/C和712G/A之間組合的單體型GGA可能是AD的保護(hù)因素；BDNF196G/A、11757G/C和712G/A SNP之間組合的雙體型ACG-