Rap2在腎癌發(fā)生中的作用研究.pdf

1、Rap2是小分子量G蛋白R(shí)as家族成員之一。它與對(duì)原癌基因Ki-Ras有轉(zhuǎn)化抑制作用的Rap1具有60％的氨基酸序列相似性。盡管Rap1的功能涉及細(xì)胞黏附,細(xì)胞極性,細(xì)胞增殖和分化等,但Rap2的功能仍然不甚清楚。最近隨著幾種Rap2特有靶蛋白的發(fā)現(xiàn),Rap2特有的功能受到關(guān)注。為研究Rap2對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)特性的影響,本研究首先建立了穩(wěn)定表達(dá)Rap2、Rap1及Rap1活性突變體Rap1-12V的HEK293細(xì)胞體系,并對(duì)上述細(xì)胞的生長(zhǎng)特性

2、進(jìn)行了體外和體內(nèi)分析。通過(guò)對(duì)上述細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線的測(cè)定,發(fā)現(xiàn)Rap2對(duì)HEK293細(xì)胞的附著依賴性生長(zhǎng)沒(méi)有明顯促進(jìn)作用;然而,軟瓊脂集落分析結(jié)果表明Rap2的表達(dá)能顯著促進(jìn)HEK293細(xì)胞的集落形成能力,提示Rap2促進(jìn)了細(xì)胞的非附著依賴性生長(zhǎng)這一與腫瘤發(fā)生過(guò)程密切相關(guān)的細(xì)胞轉(zhuǎn)化特性;細(xì)胞鋪展實(shí)驗(yàn)顯示Rap2的表達(dá)能顯著抑制由R-Ras-38V、C3G-CAAX及Rap1-63E所誘導(dǎo)的HEK293細(xì)胞的鋪展,提示Rap2的表達(dá)能促進(jìn)細(xì)胞