L-瓜氨酸對(duì)大鼠胃缺血-再灌注損傷的保護(hù)作用及NOS表達(dá)的調(diào)控.pdf

1、目的：L-瓜氨酸為天然活性成分，近年來(lái)研究資料表明其具有心肌保護(hù)、降血脂、降血壓等多種藥理活性，本研究旨在研究L-瓜氨酸對(duì)大鼠胃缺血-再灌注損傷的保護(hù)活性及作用機(jī)制。
　　 方法：本實(shí)驗(yàn)采用健康雄性Sprague-Dawley大鼠，將雄性大鼠隨機(jī)分為7組，每組8只，分別為假手術(shù)組(Sham group)、模型組(GI-R group)、1400W(選擇性iNOS抑制劑)組、L-NAME(非選擇性NOS抑制劑)和L-瓜氨酸低、中、

2、高劑量組，L-瓜氨酸于手術(shù)前60 min灌胃給藥，1400W和L-NAME于缺血前30min皮下注射給藥。夾閉大鼠腹腔動(dòng)脈30min后，松開(kāi)動(dòng)脈夾血流復(fù)灌60min以建立胃缺血-再灌注(gastric ischemia-reperfusion，GI-R)模型，取胃后計(jì)數(shù)胃黏膜損傷指數(shù)；HE染色法檢測(cè)胃黏膜形態(tài)學(xué)變化；測(cè)定胃黏膜組織中一氧化氮(NO)含量；測(cè)定缺血再灌注前后胃黏膜組織中丙二醛(MDA)含量及總超氧化物歧化酶(total S

3、OD，T-SOD)、髓過(guò)氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)、總NOS(total NOS，TNOS)、誘導(dǎo)型NOS(inducible NOS，iNOS)和結(jié)構(gòu)型NOS(constitutive NOS，cNOS)活性的變化；同時(shí)，采用免疫印跡技術(shù)測(cè)定L-瓜氨酸預(yù)處理對(duì)大鼠GI-R損傷后胃黏膜組織中iNOS、神經(jīng)元型NOS(nNOS)和內(nèi)皮型NOS(endothelial NOS，eNOS)蛋白表達(dá)變化。
　　

4、結(jié)果：(1)缺血前灌胃給予L-瓜氨酸(300，600，900mg/kg)對(duì)大鼠GI-R胃黏膜均明顯減輕胃黏膜損傷指數(shù)(P＜0.001)，此外，L-NAME預(yù)處理增加了大鼠GI-R胃黏膜損傷指數(shù)(P＜0.05）；(2)大鼠GI-R損傷胃黏膜有胃黏膜糜爛、出血，局部腺體結(jié)構(gòu)紊亂，間隙擴(kuò)大，并出現(xiàn)局部胃黏膜細(xì)胞脫落以及淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)等癥狀，而L-瓜氨酸預(yù)處理組腺胃上皮基本完整、連續(xù)，腺體排列較整齊，淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)明顯減少，同時(shí)，1400W預(yù)處理也

5、明顯改善了上述大鼠GI-R損傷的病理學(xué)損傷；(3)大鼠GI-R損傷胃黏膜組織中MDA和NO含量較手術(shù)組明顯升高(P＜0.001)，T-SOD活性顯著降低(P＜0.001)，MPO活性明顯增高(P＜0.001)，L-瓜氨酸和1400W預(yù)處理顯著降低了胃黏膜組織中MDA和NO含量及MPO的活性，增加了T-SOD的活性；(4)大鼠GI-R損傷胃黏膜組織TNOS和iNOS活性明顯增加(P＜0.001)，cNOS活性顯著降低（P＜0.05），L-

6、瓜氨酸預(yù)處理明顯抑制了大鼠GI-R誘導(dǎo)的胃黏膜組織TNOS和iNOS活性增高(P＜0.01或P＜0.001)，同時(shí)顯著增加了cNOS的活性(P＜0.05)；(5)大鼠GI-R損傷胃壁黏液含量降低(P＜0.01)，高劑量L-瓜氨酸預(yù)處理明顯抑制了GI-R導(dǎo)致胃壁黏液減少(P＜0.05)，1400W對(duì)大鼠胃壁黏液含量無(wú)明顯影響(P＞0.05)，L-NAME則顯著降低了大鼠胃壁黏液含量(P＜0.05)；(6)大鼠GI-R損傷胃黏膜組織iNOS

7、蛋白的表達(dá)顯著增加(P＜0.001)，而nNOS和eNOS蛋白表達(dá)沒(méi)有明顯變化（P＞0.05），L-瓜氨酸(600，900mg/kg)預(yù)處理顯著降低了胃黏膜組織iNOS蛋白表達(dá)(P＜0.05或P＜0.001)，對(duì)nNOS和eNOS蛋白表達(dá)無(wú)明顯影響(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：(1)缺血前給予L-瓜氨酸對(duì)大鼠GI-R損傷具有保護(hù)作用；(2)抑制cNOS活性對(duì)大鼠GI-R損傷具有損害作用，而抑制iNOS活性對(duì)大鼠GI-R損傷具有