微囊化牛視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞移植治療帕金森病大鼠的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、尋找來源廣泛的有效替代細(xì)胞系一直是帕金森病(Parkinson′sdisease，PD)細(xì)胞移植領(lǐng)域備受關(guān)注的問題。本實(shí)驗(yàn)試用牛RPE細(xì)胞作為人胚RPE的替代供體應(yīng)用于大鼠的PD模型，觀察移植后療效，期待其能夠解決供體細(xì)胞的來源問題。　　免疫排斥反應(yīng)是異種移植中的最大障礙。本實(shí)驗(yàn)的主要研究?jī)?nèi)容及目的：1.詳細(xì)研究牛RPE細(xì)胞體外多巴胺及神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的分泌特性，觀察微囊包裹對(duì)細(xì)胞活性和其分泌特性的影響，從而探討其可能的作用機(jī)制并為下一步

2、的移植奠定堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)。2.將該細(xì)胞用海藻酸鈉-多聚賴氨酸包裹制作成微囊后，立體定向移植入大鼠PD模型的右側(cè)紋狀體，觀察移植后療效及移植免疫排斥反應(yīng)。3.除了將該細(xì)胞應(yīng)用于傳統(tǒng)的6-羥基多巴胺(6-hydroxydopamine，6-OHDA)大鼠PD模型之外，還在本實(shí)驗(yàn)室以往工作的基礎(chǔ)上，將細(xì)胞移植入選擇性蛋白酶體抑制劑lactacystin制作的伴L(zhǎng)ewy小體形成的PD模型。該模型比6-OHDA模型更接近PD患者的病理改變，能更好

3、的模擬自然狀態(tài)下的PD產(chǎn)生過程，若應(yīng)用成功將有更強(qiáng)的說服力?！　〉谝徊糠质桥PE細(xì)胞的體外原代培養(yǎng)及鑒定　　目的：建立穩(wěn)定的牛RPE細(xì)胞原代培養(yǎng)、純化及鑒定方法?！　〉诙糠质桥PE細(xì)胞體外生物學(xué)特性研究　　目的：觀察牛RPE細(xì)胞體外DA以及神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的分泌特性，檢測(cè)該細(xì)胞中THmRNA以及蛋白水平的表達(dá)?！　〉谌糠质呛Ｔ逅徕c微囊的制作及微囊對(duì)細(xì)胞生物活性的影響　　目的：優(yōu)化適合牛RPE細(xì)胞的微囊制作條件，觀察微囊化