特發(fā)性智力低下患者染色體亞端粒區(qū)微小結(jié)構(gòu)異常分析.pdf

1、目的:智力低下(mental retardation,MR)是一類(lèi)常見(jiàn)的神經(jīng)發(fā)育障礙性疾病,智力低下發(fā)病率高,在人群中發(fā)生率約3％。染色體亞端粒區(qū)微小結(jié)構(gòu)異常是引起特發(fā)性智力低下的重要因?yàn)?而以往的檢測(cè)技術(shù)存在很大的缺陷。本研究探討多重連接依賴(lài)的探針擴(kuò)增(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)技術(shù)在特發(fā)性MR患者臨床檢測(cè)中的應(yīng)用。
　　 方法:選取25例已知正

2、?；蛉旧w異常的病例,提取其外周血基因組DNA,應(yīng)用荷蘭MRC-Holland公司的P070型MLPA亞端粒探針試劑盒,樣本DNA經(jīng)變性、雜交、連接、擴(kuò)增等步驟,其產(chǎn)物通過(guò)ABI公司3700型測(cè)序儀毛細(xì)管電泳技術(shù)分離,軟件分析,將MLPA檢測(cè)結(jié)果與已知核型對(duì)照,確定MI,PA技術(shù)的可信性。在此基礎(chǔ)上,應(yīng)用MLPA檢測(cè)118例特發(fā)性MR患者,對(duì)于MLPA檢出染色體異常的病例,通過(guò)熒光原位雜交(fluorescence insituhybr

3、idization,FISH)等技術(shù)進(jìn)行驗(yàn)證。
　　 結(jié)果:通過(guò)優(yōu)化DNA質(zhì)量,調(diào)整:DNA的用量、DNA的變性時(shí)間、PCR反應(yīng)的條件、毛細(xì)管電泳時(shí)間與電壓等,應(yīng)用MLPA技術(shù)檢測(cè)25例標(biāo)本均得到明確的結(jié)果,與其它技術(shù)分析分析結(jié)果一致。
　　 應(yīng)用MLPA技術(shù)檢測(cè)特發(fā)性MR患者,發(fā)現(xiàn)6例染色體亞端粒區(qū)異常的病例:分別為1p36.3區(qū)域缺失、1p部分重復(fù)、15q部分缺失、15q部分重復(fù)、22q部分缺失、12q部分缺失合并1

4、7p部分重復(fù)。用FISH技術(shù)對(duì)這些病例進(jìn)行驗(yàn)證,得到了一致的結(jié)果。
　　 結(jié)論:MLPA技術(shù)為智力低下的病因?qū)W分析提供了有價(jià)值的診斷手段,為對(duì)智力低下患者的遺傳咨詢(xún)及預(yù)防復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)提供了依據(jù)。這6例染色體亞端粒區(qū)微小異?；颊叩陌l(fā)現(xiàn),為我們進(jìn)一步研究表型與基因型的關(guān)系、尋找智力低下疾病基因提供了新材料。
　　 智力低下給患者及其家庭帶來(lái)極人的心理創(chuàng)傷和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),影響整個(gè)國(guó)家的出生人口素質(zhì)。遺傳異常是導(dǎo)致智力低下的病因之一,目