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文檔簡介
1、[目的]:
通過研究奧利司他對(duì)人胰腺癌BxPC-3、PANC-1細(xì)胞增殖、凋亡的影響及腫瘤細(xì)胞脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,F(xiàn)AS)表達(dá)變化,探討奧利司他在胰腺癌BxPC-3、PANC-1細(xì)胞增殖、凋亡中的可能作用機(jī)制及其在胰腺癌治療價(jià)值。
[方法]:
采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法檢測奧利司他對(duì)人胰腺癌BxPC-3、PANC-1細(xì)胞增殖的抑制作用;Hoe
2、chst33258染色液單染觀察人胰腺癌BxPC-3、PANC-1細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化;碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色流式細(xì)胞技術(shù)檢測細(xì)胞周期情況;AnnexinⅤ-FITC/PI染色流式細(xì)胞術(shù)判斷細(xì)胞早期凋亡水平;免疫印跡法測定FAS蛋白表達(dá),實(shí)時(shí)熒光定量多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerasechain reaction,PCR)法測定FAS mRNA表達(dá)水平。
[結(jié)果]:
奧利司他對(duì)人胰腺癌
3、BxPC-3、PANC-1細(xì)胞均有明顯的增殖抑制作用,且呈明顯的時(shí)間、劑量依賴性;奧利司他對(duì)于兩株細(xì)胞均有促進(jìn)凋亡的作用,在PANC-1細(xì)胞中可觀察到典型的致密濃染細(xì)胞核;流式檢測結(jié)果顯示奧利司他作用后BxPC-3細(xì)胞被阻滯于G0/G1期,而在PANC-1細(xì)胞則則出現(xiàn)明顯的亞二倍體凋亡峰;流式細(xì)胞技術(shù)分析提示,在BxPC-3和PANC-1細(xì)胞中,細(xì)胞早期凋亡的比例均隨奧利司他濃度升高有不同程度的增加;免疫印跡法測定FAS蛋白表達(dá)隨奧利司
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