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文檔簡介
1、目的:利用人白介素-21(Interleukin-21,IL-21)及其聯(lián)合5-Fu在體外作用于人胃癌細胞SGC-7901,觀察其對胃癌細胞細胞增殖、遷移、凋亡的影響,并探討IL-21發(fā)揮抗腫瘤作用及相關機制。
方法:(1)培養(yǎng)人胃癌細胞SGC-7901,實驗設四組:IL-21組(IL-21100ng/ml),半量5-Fu+IL-21組(5-Fu25μg/ml+IL-21100ng/ml),5-Fu組(5-Fu50μg/ml)
2、,5-Fu+IL-21組(5-Fu50μg/ml+IL-21100ng/ml),用MTT法檢測各組藥物對胃癌細胞增殖的抑制作用;(2)劃痕實驗法檢測各組藥物對胃癌細胞遷移能力的抑制作用;(3)TUNEL法檢測各組藥物對胃癌細胞凋亡的影響;(4)Western Blot法檢測各組藥物作用后凋亡相關蛋白caspase-3、caspase-8、bcl-2及c-myc的表達情況。
結果:(1)MTT檢測結果顯示,與5-Fu單純應用相比
3、,IL-21、半量5-Fu與IL-21聯(lián)合作用于人胃癌細胞SGC-7901,24h時,對細胞增殖的抑制率均較低(p均<0.001),但48h時半量5-Fu與IL-21聯(lián)用抑制率與5-Fu組已無顯著差異(p>0.05);而5-Fu與IL-21組聯(lián)用,在24h和48h的抑制率均較單純使用5-Fu組高(p<0.001);(2)劃痕實驗結果顯示IL-21、半量5-Fu+IL-21組、5-Fu組和5-Fu+IL-21組,對人胃癌細胞SGC-790
4、1遷移能力均有抑制作用,且抑制作用依次增強;半量5-Fu+IL-21組較之5-Fu組,在24h時遷移抑制作用有明顯差異(p<0.001),至48h時,抑制作用仍低于單純5-Fu組,但差異的顯著性降低(p<0.05)。(3) TUNEL實驗結果顯示IL-21、半量5-Fu+IL-21、5-Fu和5-Fu+IL-21,對人胃癌細胞SGC-7901的凋亡均具有促進作用,凋亡細胞百分比依次遞增;5-Fu+IL-21組與5-Fu組相比,24h、4
5、8h凋亡細胞百分比均明顯增強(p<0.001);半量5-Fu+IL-21組在24h和48h與5-Fu組相比凋亡細胞百分比較低,但48h時,兩組之間差異較小(p<0.05);(4)Western Blot實驗結果顯示半量5-Fu+IL-21組、5-Fu組和5-Fu+IL-21組,caspase-3、caspase-8、c-myc的表達呈遞增趨勢,其中c-myc的遞增趨勢最為明顯,蛋白bc1-2的表達呈遞減趨勢;與5-Fu組相比,半量5-F
6、u+IL-21組兩個時點各凋亡蛋白的表達具有明顯的差異(p<0.001),但48h時兩組之間各蛋白的表達量的差異較24h時已有所縮?。╬<0.05)。
結論:(1)IL-21具有抑制人胃癌細胞SGC-7901的增殖、遷移,并促進其凋亡的作用;(2)IL-21與化療藥物5-Fu常規(guī)用量聯(lián)合使用時,上述作用得到協(xié)同加強,聯(lián)合使用IL-21有利于提高單純使用5-Fu的抗腫瘤效果;(3) IL-21與化療藥物半量5-Fu聯(lián)合使用時,抗
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