血管緊張素Ⅱ-Ⅰ型受體阻斷劑對(duì)心力衰竭大鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的：近年來(lái)的研究證實(shí)，心力衰竭時(shí)有廣泛的心肌細(xì)胞凋亡存在，細(xì)胞凋亡導(dǎo)致心肌細(xì)胞數(shù)量減少在心力衰竭的病理機(jī)制中發(fā)揮著重要作用。血管緊張素Ⅱ在心衰時(shí)被激活，并能導(dǎo)致心肌凋亡，氯沙坦為新型血管緊張素ⅡⅠ受體拮抗劑（AT1R），可能通過(guò)抑制AngⅡ誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡而產(chǎn)生心肌保護(hù)作用。氯沙坦治療心力衰竭可以防治心室重構(gòu)，改善心功能，但其機(jī)制是否與抑制心衰細(xì)胞凋亡，改善心肌超微結(jié)構(gòu)，減少心肌酶外漏有關(guān)，尚未見(jiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)旨在觀察氯沙坦對(duì)心力衰竭

2、大鼠心肌細(xì)胞凋亡程度的影響，分析促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl—2在該影響中的變化。觀察各組心肌超微結(jié)構(gòu)及心肌酶的變化。 方法：選24只雄性SD大鼠（8周齡），分為對(duì)照組、心衰組和治療組，每組8只。采用阿霉素（ADR）腹腔注射造模，心衰模型組和治療組腹腔注射ADR4 mg／kg，每周1次，共6周，治療組同時(shí)灌胃給氯沙坦20 mg／kg．d，對(duì)照組：注射相同體積的注射用水。末次給藥后檢測(cè)各組血清中CPK、CK—MB及LDH的含

3、量。取材制作電鏡切片，透射電鏡觀察各組心肌超微結(jié)構(gòu)改變，用原位脫氧核糖核酸酶未端標(biāo)記法（TUNEL法）檢測(cè)大鼠心肌細(xì)胞凋亡，免疫組化法檢測(cè)大鼠心肌Bax、Bcl—2蛋白的表達(dá)。 結(jié)果：①對(duì)照組與心衰組比較，對(duì)照組心肌組織結(jié)構(gòu)正常，心衰組心肌細(xì)胞損傷明顯，心肌組織超微結(jié)構(gòu)觀察，心衰組心肌細(xì)胞廣泛壞死，肌纖維存在斷裂，肌原纖維部分溶解，肌膜線粒體膜破損明顯，局部核膜破壞，并可見(jiàn)到凋亡小體。對(duì)照組與心衰組血清心肌酶CPK分別為132±

4、59U/L、1541±408U/L，CK—MB分別為12±6U/L、1135±347U/L，LDH分別為186±75U/ml、2856±581U/ml，心衰組動(dòng)物血清CPK、CK—MB、LDH較對(duì)照組均顯著升高（p<0．01）。對(duì)照組與心衰組心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)分別為4．02±0．18、25．70±4．13，心衰組心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)顯著高于對(duì)照組（p<0．01）；對(duì)照組與心衰組Bax蛋白表達(dá)分別為31．22±1．21、46．96±2．57，B

5、cl—2蛋白表達(dá)分別為39．67±2．83、28．35±1．55，心衰組Bax蛋白表達(dá)高于對(duì)照組，Bcl—2蛋白表達(dá)低于對(duì)照組（p<0．01）②治療組與心衰組比較，心肌組織超微結(jié)構(gòu)受損減輕，治療組大部分肌纖維連續(xù)完整，胞核形態(tài)正常，細(xì)胞核結(jié)構(gòu)基本正常。治療組與心衰組血清心肌酶CPK分別為599±125U/L、1541±408U/L，CK—MB分別為176±56U/L，1135±347U/L，LDH分別為622±161U/ml、2856±

6、581U/ml，治療組較心衰組明顯降低（P<0．01）。凋亡檢測(cè)顯示，治療組與心衰組AI分別為12．00±1．34、25．70±4．13，治療組與心衰組相比心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)顯著下降（p<0．01）。治療組與心衰組Bax蛋白表達(dá)分別為33．51±1．43、46．96±2．57，Bcl—2蛋白表達(dá)分別為28．35±1．55、36．34±2．60，治療組與心衰組相比，Bax蛋白表達(dá)明顯下調(diào)，Bcl—2蛋白表達(dá)明顯上調(diào)（p<0．01）。③治療組

7、與對(duì)照組比較，治療組心肌組織超微結(jié)構(gòu)受損較輕。治療組與對(duì)照組血清心肌酶CPK分別為599±125U/L、132±59U/L，CK—MB分別為176±56U/L、12±6，LDH分別為622±161U/ml、186±75U/ml，治療組心肌酶CPK、CK—MB和LDH雖明顯下降，但仍高于對(duì)照組（p<0．05）；治療組與對(duì)照組A1分別為12．00±1．34、4．02±0．18，治療組心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)稍高（p<0．05）；治療組與對(duì)照組Bax

8、蛋白表達(dá)分別為33．51±1．43、31．22±1．21，Bcl—2蛋白表達(dá)分別為36．34±2．60、39．67±2．83，治療組Bax、Bcl—2蛋白表達(dá)與對(duì)照組比較，差異不明顯（p>0．05）。 結(jié)論：多次間斷腹腔注射阿霉素，是建立大鼠慢性充血性心力衰竭模型的一種簡(jiǎn)便可靠的方法。心衰時(shí)心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)受損明顯，心肌酶外漏，血清檢測(cè)心肌酶升高明顯。心力衰竭過(guò)程中發(fā)生了心肌細(xì)胞凋亡，并且Bax蛋白表達(dá)升高，Bcl—2蛋白表達(dá)降