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文檔簡介
1、背景與目的:腎素—血管緊張素系統(renin-angiotensin system,RAS)對心血管系統、細胞功能、水鹽平衡等有重要的調節(jié)作用。研究表明,在許多組織或器官,如腎臟、心臟和血管中存在著獨立的局部腎素—血管緊張素系統(local renin-angiotensinsystem,LRAS)。血管緊張素Ⅱ(angiotensionⅡ,AngⅡ)是腎素-血管緊張素系統(RAS)的主要效應因子,其生物學功能主要體現在調節(jié)血管張力和血
2、流、促進細胞生長和增生作用。近年研究發(fā)現AngⅡ可以通過調節(jié)細胞因子、化學趨化因子和粘附因子等多種炎性介質的表達參與機體炎癥反應相關疾病的發(fā)生、發(fā)展。纈沙坦(Valsartan)作為新型血管緊張素受體阻滯劑(angiotensin receptor antagonist,ARB)可以有效阻斷AngⅡ發(fā)揮作用。
本研究通過運用不同濃度AngⅡ制劑及聯合運用纈沙坦作用于人工培養(yǎng)的成年大鼠原代心肌細胞,檢測培養(yǎng)液中致炎性細胞因子:腫
3、瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),白介素-6(interleukin-6,IL-6)濃度,觀察AngⅡ對心肌細胞的致炎作用以及纈沙坦對心肌細胞的保護作用,為臨床運用藥物防治由AngⅡ引發(fā)的心臟炎癥反應提供新的思路和依據。材料與方法1、應用分步消化法進行Wistar大鼠心肌細胞原代培養(yǎng),采用電鏡觀察形態(tài)學方法鑒定所培養(yǎng)的心肌細胞。2、將培養(yǎng)的心肌細胞隨機分為對照組和實驗組Ⅰ、Ⅱ。對照組僅進行普通
4、培養(yǎng),不進行藥物干預。實驗組Ⅰ采用不同濃度AngⅡ制劑作用于人工培養(yǎng)的原代大鼠心肌細胞。實驗組Ⅱ在實驗組Ⅰ的基礎上加入定量AngⅡ受體拮抗劑——纈沙坦。應用酶聯免疫吸附方法(ELISA)檢測各個標本TNF-α、IL-6的濃度值。
實驗結果數據采用均數±標準差((?)±S)表示,采用統計分析軟件SPSS14.0進行統計分析。統計方法用重復測量數據的方差分析,各項統計結果,P<0.05為差異有統計學意義。3、運用電鏡觀察各分組的細
5、胞內部結構變化。
結果:1、對照組和實驗組Ⅰ、Ⅱ細胞培養(yǎng)液的TNF-α、IL-6濃度比較存在差異,有統計學意義(P<0.05);2、實驗組Ⅰ細胞培養(yǎng)液的TNF-α、IL-6濃度明顯高于實驗組Ⅱ,差異有統計學意義(P<0.0);3、電鏡下觀察對照組細胞和實驗組Ⅰ細胞具有顯著形態(tài)學差異,對照組細胞和實驗組Ⅱ細胞具有形態(tài)學差異,同時實驗組Ⅰ、Ⅱ的細胞也存在形態(tài)學差異。
結論:1、通過檢測各組細胞培養(yǎng)液上清TNF-α、IL-
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