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文檔簡介
1、實驗目的:通過研究脂聯素對3T3-L1前脂肪細胞系的增殖、遷徙和凋亡的影響,初步闡明脂聯素促進脂肪組織創(chuàng)面愈合的作用及機制,為手術切口并發(fā)癥的減少及防治提供理論依據。
實驗方法:體外培養(yǎng)小鼠3T3-L1前脂肪細胞系,誘導分化后用油紅“O”染色方法進行鑒定。應用免疫組化及逆轉錄一聚合酶鏈反應法檢測前脂肪細胞脂聯素受體的表達。以不同濃度梯度的脂聯素干預培養(yǎng)的3T3-L1前脂肪細胞系為實驗組,對照組不加脂聯素。小鼠脂聯素Elisa檢
2、測法測定細胞自身分泌脂聯素的濃度。應用MTT/傷口愈合模型研究不同濃度脂聯素對前脂肪細胞增殖和遷徙的影響,且應用Annexin-V-FITC凋亡檢測法測定其凋亡率的變化。
實驗結果:脂聯素受體可在小鼠3T3-L1前脂肪細胞中表達。細胞遷徙及增殖實驗結果表明實驗組的增殖和遷徙速率明顯大于對照組(P<0.05);隨著脂聯素濃度的提高,細胞增殖和遷移的活性逐漸增大,當脂聯素濃度達到25ug/ml時,促進細胞增殖和遷徙能力達到最強。細
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